不同时程睡眠剥夺模型大鼠下丘脑食欲素A、γ-氨基丁酸表达及安神解郁汤作用

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目的:  (1)观察安神解郁汤对不同时程睡眠剥夺模型大鼠行为学、下丘脑形态学及其中食欲素A、γ-氨基丁酸表达的影响,探讨失眠可能的发生机制,以及安神解郁汤治疗失眠的可能原理,为安神解郁汤的临床应用提供实验依据。  (2)观察安神解郁汤治疗失眠的临床有效性,为安神解郁汤的推广运用提供更有力的理论基础。  方法:  (1)动物实验:将96只经过清洁后的大鼠根据按统计学的要求分组即空白组、模型组、艾司唑仑组(西药组)及安神解郁汤组(中药组),每组24只;采用腹腔内注射对氯苯丙氨酸(PCPA)诱导大鼠失眠模型,除空白组不予任何处理外,其余三组分别进行造模;造模成功后各组再按睡眠剥夺时间分组,即2天组、4天组、6天组,每组8只,同时按组别灌胃给药。观测各组大鼠行为学和体重变化;并在光学显微镜观察下丘脑神经细胞形态随时间的变化;免疫组化法观测不同时程下丘脑食欲素A、γ-氨基丁酸的表达。  (2)临床研究:选取门诊符合前提条件的失眠患者68例,随机分成中药组35例、西药组33例;采纳匹兹堡睡眠质量指数(PSQI)、中医症状量表判定。  结果:  动物实验:  (1)不同时程,模型组大鼠体重增加量较其他组明显下降,艾司唑仑组和安神解郁汤组体重明显增加,中药组与西药组比较,差异不明显(P>0.05)。  (2)不同时程模型组大鼠下丘脑神经细胞分布减少,染色质深,核仁小而固锁,细胞分裂停止;中药组和西药组形态与空白组相似,神经元排列较紧密,胞质较均匀,结构较完整;空白组随时间变化不明显。  (3)不同时程空白组食欲素A的含量未见明显变化(P>0.05),模型组食欲素A含量均高于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);干预2、4、6天时,艾司唑仑组、安神解郁汤组下丘脑食欲素A含量均低于模型组,差异有统计学意义(P<0.05);且干预4天、6天时,安神解郁汤组食欲素A含量低于艾司唑仑组,差异有统计学意义(P<0.05)。  (4)不同时程空白组γ-氨基丁酸的含量未见明显变化,模型组γ-氨基丁酸含量均低于空白组,差异有统计学意义(P<0.05);干预2、4、6天时,艾司唑仑组、安神解郁汤组下丘脑γ-氨基丁酸含量高于模型组(P<0.05),差异有统计学意义(P<0.05);且干预4天、6天时,安神解郁汤组γ-氨基丁酸高于艾司唑仑组,差异有统计学意义(P<0.05)。  临床研究:中药组、西药组总有效率分别为87.10%、83.33%,二者无明显差别;两组治疗4周后无论是中医症状积分还是匹兹堡指数较治疗前明显降低(P<0.05),说明安神解郁汤治疗失眠与艾司唑仑临床疗效相当;中医症候疗效比较,中药组、西药组有明显差异(P<0.05)。  结论:  (1)安神解郁汤能够改善失眠大鼠的行为学变化和下丘脑神经元结构病理改变。  (2)睡眠剥夺后,下丘脑食欲素A表达升高,γ-氨基丁酸表达降低,证实食欲素A、γ-氨基丁酸与失眠密切相关。  (3)安神解郁汤治疗失眠的机理可能与调整下丘脑食欲素A、γ-氨基丁酸含量的变化密切相关。  (4)不同时程睡眠剥夺下下丘脑食欲素A、γ-氨基丁酸含量变化趋势大致相反,推测两者在某种程度上可能相互影响,相互作用引起失眠的发生发展。  (5)安神解郁汤治疗失眠与艾司唑仑临床疗效相当,均能改善患者的睡眠,但导师创立的安神解郁汤的中医症状疗效优于艾司唑仑,临床应用效果显著。
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