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据世界卫生组织最新统计,全世界大约有2.4亿人感染乙型肝炎病毒(Hepatitis B virus,HBV)[1],研究表明慢性乙型肝炎患者每年内约有2%~6%逐渐发展为肝硬化、肝癌[2,3],每年大约有65万人死于慢性乙型肝炎[4]。目前慢性HBV感染的自然史分为4个阶段[5-7],包括免疫耐受期(Immune tolerant phase)、免疫清除期(Immune clearance phase)、非活动复制期(Inactive phase)和再活动期(Reactivation phase)。HBeAg自然转换需经历一个漫长的时期,而抗病毒治疗的HBeAg转换率也只有40%左右[8-12],离我们理想的转换率还有一定的差距。病毒的变异影响着病毒的表达和复制,最常见的即为前C区和BCP区变异,前C区变异常见为G1896A突变后形成了一个新的终止密码子,从而使HBeAg的表达被终止。BCP区最常见的变异是A1762T和Gl764A的双点突变,通过降低前C区mRNA的转录水平从而减少HBeAg合成[13,14]。多项全基因组关联研究(Genome-wide association study,GWAS)[15-19]证明了HLA-DP/DQ、IL28B在HBV持续感染和清除过程中有着显著的相关性。慢性HBV感染的进程和结局受到病毒因素(PC/BCP)和宿主因素(HLA-DP/DQ、IL28B)两方面的影响,但是自发HBeAg血清学转换的免疫遗传学机制尚不清楚。目前也还没有针对HBeAg转换的大样本队列GWAS研究,所以,我们前瞻性的收集了低年龄HBeAg未转换(年龄小于20岁,HBeAg阳性)、低年龄HBeAg转换(年龄小于20岁,HBeAg阴性)、高年龄HBeAg转换(年龄大于50岁,HBeAg阴性)和高年龄HBeAg未转换(年龄大于50岁,HBeAg阳性)四组病例样本,通过对PC/BCP变异和HLA-DP/DQ、IL28B基因多态性的分析,从病毒和宿主两个方面对HBeAg早发血清学转换进行研究,希望能进一步证明HLA-DP/DQ、IL28B单核苷酸多态性及PC/BCP变异与HBeAg早发/迟发血清学转换的关系。我们的主要研究结果如下:1.第一阶段收集CHB患者共437例,低年龄HBeAg未转换组106例,低年龄HBeAg转换组179例,高年龄HBeAg转换组90例及高年龄HBeAg未转换组62例。低年龄HBeAg转换组男性患者比例明显高于高年龄HBeAg未转换组(65.9%vs 46.7%)。患者进入免疫清除期的机率明显高于再活动期(23.7%,35.5%vs 9.5%),ALT在正常范围内时比较四组病例的ALT和HBV DNA,HBeAg阳性组均显著高于HBeAg阴性组(24.1±8.33,6.9±1.2 vs 20.6±8.7,4.2±1.3)。HBeAg阴性患者中,高年龄段的HBV DNA阳性率为42.2%,明显高于低年龄患者的18.4%(χ2=17.4,P<0.05)。2.低年龄HBeAg未转换组,全为野生型,并未发生PC或BPC位点突变;低年龄HBeAg转换组,PC区变异占69%;但BCP双位点突变及野生型,仍占约25%;高年龄HBeAg转换组,BCP区变异和野生型分别占了24%和17%;。高年龄HBeAg未转换组,有6例(11%)患者虽然发生了PC区变异,但仍然表现为HBeAg持续阳性。高年龄HBeAg阳性患者,PC/BCP变异型与野性型相比,在年龄、性别、ALT、HBV DNA及HBsAg水平均无统计学意义。BCP突变型HBeAg滴度显著低于野生型患者(t=-3.1,P<0.05)。PC突变型HBeAg滴度低于野生型患者,但无统计学差异(t=-1.4,P>0.05)。3.HBV持续阳性患者rs12979860 T和rs8099917 G等位频率(9.0%,8.5%)显著高于早发转换患者(3.4%,3.3%)(P=1.45×10-4,P=3.15×10-4),为危险等位。IL28B rs12979860 CC和rs8099917 TT基因型与慢性HBV患者HBeAg早发血清学转换显著关联(rs12979860,p=8.74×10-4;rs8099917,p=2.15×10-3);IL28B rs8099917、rs12979860GT单倍型与HBeAg持续阳性患者显著关联(P=2.39×10-3),IL28B rs8099917、rs12979860 TC单倍型与HBeAg早发血清学发转换患者显著关联(P=2.39×10-3)。4.HLA-DP/DQ与HBeAg自发血清学转换并无明显的相关性。总之,本研究通过PC/BCP变异实验证明了病毒变异能降低HBeAg水平,并影响HBeAg转换率,但病毒因素并不能完全解释HBeAg转换结局;通过HLA-DP/DQ、IL28B与HBeAg早发或迟发血清学转换的研究,从宿主遗传方面证明了IL28B与HBeAg早发转换的相关性,而HLA-DP/DQ并没有发现明显的相关性。