胡杨液泡膜Na<'+>/H<'+>反向运输体、ATPase及PPase与耐盐性的关系

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胡杨是一种十分珍贵的木本植物抗逆种质资源,有很好的抗干旱、抗盐碱能力,是唯一可以在我国西北荒漠和戈壁地区生长并形成森林的乔木树种,对维持生态平衡有决定性作用,研究其耐盐机理有重要意义。本文以胡杨和欧洲山杨愈伤组织为研究材料,比较了两者耐盐性的差别。在不加盐的培养基中,胡杨生长速度缓慢,欧洲山杨生长速度较快。在培养基中加入不同浓度NaCl,欧洲山杨的生长明显受到抑制,随着NaCl浓度的增加受害程度增加,但KCl的影响较弱;胡杨对NaCl敏感性较弱,50mmolNaCl反而对它的生长有促进作用,但KCl对它的影响较欧洲山杨强,说明胡杨对钾盐敏感,欧洲山杨对钠盐敏感。经X-射线能谱分析,盐胁迫下胡杨主要将有害的Na+区隔化到液泡内,而欧洲山杨细胞中的Na+几乎均匀分布在细胞质和液泡内,而且胞内K+含量急剧减少,说明离子区隔化和离子平衡与植物耐盐性有关。经捣碎破碎细胞后,经差速离心和不连续蔗糖密度梯度离心得到纯化的胡杨和欧洲山杨液泡微囊。通过检测V-ATPase水解活性、质子泵活性对专一性抑制剂的敏感性及V-PPase质子泵活性检验了所提膜微囊的纯度。首次用生化的方法检测到胡杨和欧洲山杨液泡膜上存在Na+/H+反向运输休(胡杨Km=20.91mm,欧洲山杨Km=11.4mm);并发现它们都可以转运Na+和K+,但对K+的亲和力相对较低。Na+/H+反向运输体的抑制剂-氨氯吡嗪咪(Amiloride)能明显抑制两者转运Na+的活性,Amiloride的类似物异丁基氨氯吡嗪咪(MIA)对转运活性也有一定抑制作用,但对胡杨Na+/H+反向运输体的抑制效果比欧洲山杨大,可能说明两者在蛋白结构上存在差异。不同浓度NaCl、KCl处理后,欧洲山杨液泡膜上V-ATPase水解活性、质子泵活性、V-PPase活性及Na+/H+反向运输体活性均比对照有明显下降,胡杨的这些酶类受抑制程度相对较弱,50mmolNaCl还可以促进其活性的增加。葡萄糖酸钠和ABA处理也会影响到胡杨和欧洲山杨液泡膜上各种酶的活性,但后者受抑制程度更大。可能预示这些酶与植物耐盐性有关。
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