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华根霉（Rhizopus chinensis CCTCC M201021）膜结合脂肪酶（mb-RCL）具有较强的非水相催化合成活性，在生物香料、生物柴油等领域具有较好的应用前景。本论文通过对华根霉菌体形态与其mb-RCL合成活性关系及其影响因素的研究，结合华根霉脂肪酶mb-RCL液态发酵的生物学特性和要求，进行发酵罐装置改进和冷模特性的研究，通过“形态工程”提高该脂肪酶发酵水平，并在“无溶剂”反应体系中进行应用，该研究对于丰富我国脂肪酶的新品种和丝状真菌发酵的相关理论研究都有积极的意义和价值。主要研究结果如下：（1）针对丝状真菌液态发酵困难的问题，在7L搅拌式发酵罐中进行华根霉脂肪酶mb-RCL放大生产研究。结果表明在发酵罐中华根霉菌丝体呈现两种生长形态，即在挡板、电极、搅拌桨等处呈聚集态和在发酵液中呈游离态，并且呈聚集态的菌丝体表现出较高合成酶活。SDS-PAGE及Western Blot分析表明华根霉菌体呈聚集生长有利于具合成活性的膜结合脂肪酶的表达及在细胞膜上积累。（2）采用饥饿胁迫策略考察华根霉脂肪酶的液态发酵。摇瓶水平研究结果显示营养饥饿胁迫对于菌体生长及单位菌体酶活无积极作用，但厌氧胁迫可提高单位菌体酶活18.8%。发酵罐水平研究结果表明厌氧胁迫易引起华根霉菌体形态发生变化，致使mb-RCL发酵水平降低。（3）改进发酵罐装置和条件优化提高华根霉脂肪酶mb-RCL液态发酵水平。基于华根霉液态发酵生物学特性和要求对搅拌式发酵罐装置进行改进，以及发酵罐冷模特性研究，提出较优操作参数。最终使得华根霉脂肪酶mb-RCL单位菌体酶活达到324.78U/g，菌体干重量达到19.08g/L，发酵单位体积总活力达到6196.88U/L，橄榄油利用率100%，发酵水平提高了5.5倍。（4）以华根霉mb-RCL为催化剂，在“无溶剂”反应体系中催化己酸乙酯的合成。以产物己酸乙酯为“溶剂”，底物（乙醇及己酸）浓度为3.56mol/L，反应温度为37℃，摇床转速为200r/min，反应3天时补加mb-RCL，己酸乙酯转化率可达到77%。