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目的:从体内外分别研究阿司匹林增加动脉粥样斑块稳定性作用及其可能的分子机制,并观察其发挥作用的最佳剂量。方法:体内实验采用雄性新西兰兔高脂饮食加腹主动脉内膜剥脱术制成高脂性动脉粥样硬化模型,然后分别给予阿司匹林5-20mg/kg治疗4周,实验末诱发斑块破裂,运用图像分析方法观察阿司匹林对粥样斑块破裂处血栓形成面积的影响;利用光镜观察破裂斑块的形态学特征;用比浊法检测血小板聚集性;用免疫组化方法测定巨噬细胞的蛋白表达;原位杂交方法分别测定COX-2mRNA和MMP-2mRNA表达。体外实验采用人单核细胞THP-1细胞株,用RPMI1640培养基适应性培养后,利用佛波酯促使其分化为巨噬细胞后,分别用含阿司匹林12.5-200μg/ml的培养基孵育24h,用ELISA法分别测定细胞培养上清液中MMP-2、MMP-9、PGE2和PGD2含量;用RT-PCR法分别检测细胞中MMP-2、MMP-9、PPARα、PPARγ、COX-1、COX-2、mPGES-1和L-PGDS mRNA表达;用Western blot法分别测定PPARα、PPARγ、NF-κB、mPGES-1和L-PGDS蛋白表达。结果:(1)阿司匹林5mg/kg和10mg/kg组可以抑制粥样斑块破裂处血栓的形成,且5mg/kg组的作用更明显。(2)阿司匹林可以抑制斑块中泡沫细胞的形成和聚集,使纤维帽尤其是肩部区的结构保持得较为完整。(3)阿司匹林5mg/kg和10mg/kg组对ADP或AA诱导的血小板聚集均有较好的抑制作用,当剂量增加至20mg/kg时,阿司匹林对血小板的聚集抑制作用反而减弱。(4)阿司匹林5mg/kg和10mg/kg组可明显减少斑块内巨噬细胞数目;阿司匹林也能降低斑块中COX-2mRNA的表达,且随着剂量的增加作用增强,在10-20 mg/kg组的作用较为明显;还能明显降低粥样斑块中MMP-2 mRNA表达,但以阿司匹林5 mg/kg组的作用较好。(5)阿司匹林可抑制THP-1源性巨噬细胞分泌MMP-2和MMP-9,并且降低MMP-2和MMP-9 mRNA表达。(6)阿司匹林可以通过增加PPARα和PPARγmRNA和蛋白表达,来抑制NF-κB的蛋白表达。预先给予PPARα或/和PPARγ拮抗剂后能减弱阿司匹林抑制巨噬细胞源性MMP-9mRNA表达和释放作用,相反PPARα和PPARγ激动剂能抑制MMP-9的表达和释放。(7)阿司匹林还可以通过抑制COX-1和COX-2 mRNA表达,抑制mPGES-1 mRNA和蛋白表达,从而抑制PGE2的释放而减少PGE2依赖性的MMPs表达。同时阿司匹林亦能增加L-PGDSmRNA和蛋白表达,从而增加PGD2释放,PGD2的代谢产物15d-PGJ2,能抑制MMP-9的表达和释放。(8)上述这些体外实验结果均以阿司匹林50μg/ml的浓度较好。结论:阿司匹林具有稳定动脉粥样斑块作用,其机制可能与减少斑块区巨噬细胞数量,以及降低粥样斑块中MMPs表达有关,尤其是阿司匹林可能通过增加巨噬细胞PPARα/γ表达后抑制NF-κB,从而抑制MMPs的产生和分泌;阿司匹林也可以通过抑制COXs-mPGES-1/PGE2途径,减少PGE2生成而减少MMP-2和9的表达和释放,从而稳定粥样斑块。这些体外作用的最佳浓度为50μg/ml,可能与阿司匹林对mPGES-1/L-PGDS比值的影响有关。