酶法脱胶是一种新兴的脱胶工艺,具有反应条件温和、脱胶完全、油脂得率高、能耗低和污染小等优点。国内外有大量学者将磷脂酶用于植物油脱胶研究,均取得了良好的脱胶效果,但游离磷脂酶容易失活且难以循环利用,导致成本增加,限制了工业化应用。磷脂酶的固定化能改进这些不足。选择一种合适的酶固定化材料是实现高酶活力和高稳定性的关键。磁性纳米粒子（MNPs）由于具备超顺磁性、高比表面积和低毒性等特点而成为酶固定化材料的研究热点。本文合成环氧基修饰MNPs,并使用该粒子分别固定化磷脂酶A₁（PLA₁）、磷脂酶A₂（PLA₂）,研究固定化条件对相对酶活和固定化率的影响,探究固定化PLA₁、PLA₂的酶学性质,并将固定化PLA₁、PLA₂应用于菜籽油脱胶,通过单因素和响应面试验优化脱胶条件,为固定化酶脱胶在工业化应用提供支持。具体研究结果如下:（1）采用传统共沉淀法制备MNPs,利用3-（2,3-环氧丙氧）丙基三甲氧基硅烷（GPTMS）改性MNPs,得到环氧基修饰磁性纳米粒子（MNPs-GPTMS）。通过滴定法测得MNPs-GPTMS表面环氧基含量为0.0125 mmol/g,X-射线衍射（XRD）、扫描电镜（SEM）等表征显示环氧基修饰在MNPs表面,因此,MNPs-GPTMS具有固定化酶的潜力。（2）通过测定三种游离磷脂酶（PLA₁、PLA₂和磷脂酶B（PLB））在不同pH值和温度条件下的酶活力变化曲线,获得温度、pH值变化对游离磷脂酶酶活力的影响。选择以酶活力更高、pH值和温度耐受性更好的PLA₁、PLA₂作为后续固定化酶及其用于菜籽油脱胶的研究对象。（3）通过单因素试验,得到PLA₁固定化制备的较佳工艺条件:缓冲液pH 4.0、反应时间2.0 h、反应温度20℃、酶液添加量3.0 mL/g,在此条件下,固定化PLA₁的酶活力为3 600 U/g,固定化率为61.1%。与游离PLA₁相比,固定化PLA₁在热、储藏稳定性方面具有更好的效果。将固定化PLA₁用于菜籽油脱胶,根据单因素和响应面试验得到最佳脱胶反应条件:固定化PLA₁添加量90.00 mg/kg、反应pH 6.0、反应温度54℃、脱胶时间4.5 h,在此条件下,脱胶油磷含量降至1.450 mg/kg。固定化PLA₁具有较好的可重复使用性,在最佳脱胶条件下脱胶,重复使用10个批次后,仍保留54.1%的酶活力。（4）通过单因素试验,得到PLA₂固定化制备的较佳工艺条件:缓冲液pH 2.5、反应时间2.0 h、反应温度20℃、酶液添加量4.0 mL/g,在此条件下,固定化PLA₂的酶活力为2 850 U/g,固定化率为73.1%。与游离PLA₂相比,固定化PLA₂在储藏稳定性方面表现出更好的效果。将固定化PLA₂用于菜籽油脱胶,根据单因素和响应面试验得到最佳脱胶反应条件:固定化PLA₂添加量100.00 mg/kg、反应pH 5.6、反应温度55℃、脱胶时间4.5 h,在此条件下,脱胶油磷含量为2.520 mg/kg。固定化PLA₂还具有可重复利用的优点,脱胶10次后,仍保留其初始活性的51.1%。