论文部分内容阅读
本论文以芝芪菌质作为实验材料,对芝芪菌质多糖的分级提取、含量测定、纯化技术、结构鉴定及其免疫活性进行了研究。通过对芝芪菌质进行热水浸提,发现在料液比1:15、每次浸提时间2.0h、提取3次,粗多糖总得率为2.17%。芝芪菌质水提浓缩液在不同乙醇浓度下醇沉,得到30%、60%、90%乙醇分级沉淀的三种粗多糖GAP30、GAP30和GAP90,得率分别为0.37%、0.70%、1.04%。分别对GAP30、GAP60和GAP90三种粗多糖进行对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响、对小鼠脾淋巴细胞增殖活力的影响,对NK细胞杀伤作用的影响以及对CEF的增值和抵抗NDV感染的影响的免疫活性测定,结果发现三种粗多糖均有较好的以上免疫活性,其中GAPgo的免疫活性最为显著。
将粗多糖GAP90过DEAE-32纤维素离子交换柱,分别用水、0.15mol/L硼砂溶液洗脱、透析、浓缩、冻干。再以0.5 mol/L NaOH溶液洗去余糖及色素,用硫酸-葸酮法检测,得到四种纯化多糖GAP-1、GAP-2、GAP-3和GAP-4。分别对GAP-1、GAP-2、GAP-3和GAP-4四种纯化多糖进行对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞的影响、对小鼠脾淋巴细胞增殖活力的影响,对NK细胞杀伤作用的影响以及对CEF的增值和抵抗NDV感染的影响的免疫活性测定,结果发现四种纯化多糖均有较好的以上免疫活性,其中GAP-3的免疫活性最为显著。
分别采用UV、IR、GC对GAP-3进行结构分析,结果表明:UV扫描证明GAP-3有蛋白质吸收峰;IR分析表明GAP-3是以β型糖苷键相连结的杂多糖;GC表明GAP-3含有L-Rha、L-Fue、D-GIc、D-Gal四种单糖。用凝胶过滤法测定芝芪菌质多糖GAP-3的分子量分别为2.89x104。
对GAP-3进行体外肿瘤细胞增殖的抑制活性测定,结果表明GA-3对KB细胞和B16细胞增殖有明显的抑制作用。