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本研究根据Genbank中猪抵抗素(resistin)基因cDNA序列设计引物，采用RT-PCR的方法成功的从猪脂肪组织中扩增到RSTN基因cDNA片段，并将其克隆到pMDl8-T载体中进行序列测定，结果表明：RSTN基因cDNA长度为330bp，编码109个氨基酸和一个终止密码子。它们与Genbank中猪RSTN基因cDNA核苷酸序列同源性为100％，与Genbank其它5个物种(牛、狗、人、大鼠和小鼠)的cDNA序列进行比较，发现核苷酸序列同源性在67％～87％之间，氨基酸序列同源性在56％～79％之间，说明不同物种之间RSTN基因差异较大。
根据RSTN基因测序结果设计另一对引物，用PCR方法扩增到RSTN基因并将其亚克隆至pET-32a(+)表达载体，获得重组质粒pET-RSTN。用pET-RSTN转化大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞，用IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测结果表明，重组resistin蛋白分子量大小约30KD。对表达条件如温度、IPTG浓度及诱导时间进行优化并用SDS-PAGE检测。结果表明，30℃、4h、IPTG浓度为1mmol／L时，可溶性重组resistin的表达量最高。Western blot检测结果表明，重组resistin可与其抗体发生特异性结合，并在分子量大小约30KD处形成特异性反应条带，表明RSTN基因已在大肠杆菌成功表达。
用50％Ni-NTA柱对重组resistin进行纯化，在SDS-PAGE凝胶上为单一电泳条带。用纯化的重组resistin蛋白免疫健康家兔，制备抗血清，初步建立了resistin检测的ELISA方法。结果表明，该方法具有较强的特异性和灵敏度，抗原-抗体最佳工作浓度为1：200和1：400，resistin最低检出限量为193.75ng／mL。
综上所述，本研究成功克隆了猪RSTN基因cDNA序列，并且构建了resistin原核表达载体，获得了可溶性重组resistin蛋白，初步建立了resistin检测的ELISA方法，为进一步研究resistin的生物学功能奠定了基础。