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通过分析HIF-1α、VEGF与宫颈癌临床分期、病理分级、淋巴转移等因素的关系以及两者的相关性,探讨HIF-1α对宫颈癌组织血管生成的作用。观察低氧对Hela细胞系中HIF-1α、VEGF蛋白表达的影响,探讨低氧对其表达的调节作用。将HIF-1α基因转染人宫颈癌Hela细胞,检测阳性质粒转染组与对照组的HIF-1α、VEGF的mRNA及蛋白表达,分析HIF-1α基因对Hela细胞VEGF表达的影响,探讨HIF-1α调控宫颈癌HeLa细胞中VEGF表达的发生机制。
方法:应用免疫组化法和Westenblot法,检测宫颈炎、宫颈原位癌及不同分期宫颈癌组织HIF-1α及VEGF蛋白表达。采用免疫细胞化学法及Westenblot法检测低氧处理2h、4h、6h、8h、12h、16h、24h及常氧培养Hela细胞HIF-1α、VEGF的表达。利用脂质体介导转染技术将重组质粒PCDNA3.1-HIF-1α转染宫颈癌Hela细胞株,采用RT-PCR技术、Westernblot法检测阳性质粒转染组及对照组HIF-1α、VEGF的mRNA及蛋白的表达。
结果:HIF-1α、VEGF在宫颈癌组织中的表达明显高于宫颈炎组织,HIF-1α和VEGF的表达与宫颈癌患者的病理分级、临床分期有关,与淋巴结转移无关,两者呈正相关。低氧组HIF-1α、VEGF蛋白表达显著高于常氧组,两者呈相关性。阳性质粒转染组HIF-1α、VEGF的mRNA及HIF-1α、VEGF的蛋白表达均强于空白质粒转染组和未转染组。
结论:HIF-1α及VEGF在宫颈癌的发生及发展过程中起着重要的作用,是较好的检测宫颈癌的肿瘤标记物。低氧可诱导宫颈癌细胞HIF-1α、VEGF的强表达,且VEGF的表达依赖于HIF-1α。HIF-1α可调控宫颈癌细胞株HeLa中VEGF表达,HIF-1α有可能通过调节VEGF起到促宫颈癌组织血管生成的作用,这一调控作用可能发生在转录水平。