中美山杨杂种的组织培养以及几种植物生理指标对试管苗生根的影响

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本研究以中美山杨(Populus davidiana×P.tremuloides)优良杂种无性系为试验材料,建立和完善其组培繁殖体系,探索杂种山杨试管苗形态建成的条件及规律,同时,对其组培生根过程中几种植物生理指标进行较深入的研究。通过试验得出以下结论:1.杂种山杨组培繁殖体系:杂种山杨芽最佳消毒方法是70%~75%乙醇浸泡10~20s,0.1%氯化汞消毒3min左右;最佳繁殖途径是以腋芽作为外殖体离体快繁;山杨芽最适分化培养基为NT+6-BA1.0mg/l+KT0.3mg/l+2%蔗糖,分化率可高达87%,分化系数为4.23;最佳增殖培养基为WM+6-BA0.5mg/L+NAA0.01mg/L+2%蔗糖;组织培养中高温、透气性差的塑料膜、光强不足等因素均显著促进玻璃化苗的发生,其中封口材料是玻璃化发生的主要因子;最佳生根培养基为WM+IBA1.5mg/L+NAA0.01mg/L+2%蔗糖,生根率高达88.9%,每苗生根数可高达14条。在对组培生根影响因素的研究中发现,增殖培养时间对生根率以及生根条数的影响差异极显著,增殖培养30d~35d的试管苗生根能力最强;带茎尖的茎段与不带茎尖的茎段在生根率、生根时间、生根条数方面都没有显著差异;由遗传因素决定,山杨不同无性系生根能力存在差异,各无性系生根能力依次为ZM3>ZM1>ZM6>ZM7>ZM9>ZM2>ZM4>ZM10>ZM8>ZM11>ZM5;移栽应选择茎基部无愈伤组织,根生长粗壮、无污染的健壮苗,移栽基质为1/2珍珠岩+1/2壤土,移栽后5天内湿度维持在70%以上,并且每天喷雾2次,成活率最高可达90%。2.理化因素对试管苗生根的影响:针对杂种无性系生根难易的不同,在试管苗生根期间对4种内源激素的含量、可溶性蛋白的含量、过氧化物酶和多酚氧化酶的活性以诱导时间为梯度进行了跟踪测定。研究表明生根率与初始内源IAA、ZR含量呈正相关,与初始ABA、GA含量呈负相关,有且只有IAA与生根率相关性显著,说明内源IAA是影响中美山杨杂种无性系生根的主要因素;难易生根无性系根原基分化发生的过程中可溶性蛋白含量都升高,易生根的ZM3可溶性蛋白含量变化较大,而难生根的ZM5可溶性蛋白含量变化小,根伸长期可溶性蛋白含量程序性的减少,说明特异性蛋白表达的多少与次生根生长有关;在根原基形成过程中初始PPO活性强弱与生根能力呈正比,生根能力不同的各无性系PPO活性没有规律性;在根原基开始形成期间POD活性都出现一个最低值,活性越低,生根率越高,说明POD活性的降低对生根起着促进的作用。
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