论文部分内容阅读
目的:观察FEZF1-AS1的表达对胃癌细胞系SGC-7901增殖和侵袭的影响及其特异性调控机制。方法:胃癌SGC-7901细胞分为2组:FEZF1-AS1小干扰RNA(siRNA)组(si-FEZF1-AS1)和阴性对照组(si-NC)。构建FEZF1-AS1 siRNA和阴性对照siRNA,然后将两组siRNA分别转染到SGC-7901细胞中,通过siRNA干扰SGC-7901细胞中FEZF1-AS1基因的表达。通过集落形成实验、细胞计数试剂盒(CCK-8)、迁移和Transwell实验检测用siRNA转染的每组细胞的增殖和侵袭力,应用Real-time PCR和Western blot检测上皮间质转化(EMT)相关标志物E-钙粘蛋白(E-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和Wnt途径关键基因β-连环蛋白(β-catenin)的表达水平。结果:1.集落形成实验结果显示,si-FEZF1-AS1组细胞的集落形成能力相比于si-NC组受到抑制。CCK-8实验结果显示,si-FEZF1-AS1组细胞抑制率明显高于si-NC组。以上研究结果表明,si-FEZF1-AS1组SGC-7901细胞的增殖能力明显下降。差异有统计学意义,P<0.01。2.迁移实验结果显示,si-FEZF1-AS1组细胞间的划痕距离明显大于si-NC组。Transwell实验结果显示,si-FEZF1-AS1组侵袭转移的细胞数目相比于si-NC组明显减少。上述研究结果表明,si-FEZF1-AS1组SGC-7901细胞的侵袭和迁移能力显著降低。差异有统计学意义,P<0.01。3.RT-PCR 结果显示,si-FEZF1-AS1 组 E-cadherin mRNA 的相对表达水平相比于si-NC明显上升,Vimentin mRNA的相对表达水平明显下降。Western blot结果显示,E-cadherin蛋白水平,si-FEZF1-AS1组较si-NC组明显上升,Vimentin蛋白水平,si-FEZF1-AS1组较si-NC组明显降低。上述研究结果表明,si-FEZF1-AS1组SGC-7901细胞的EMT转化显著被抑制。差异有统计学意义,P<0.01。4.RT-PCR结果显示,si-FEZF1-AS1组β-catenin mRNA的相对表达水平相比于si-NC明显下降。Western blot结果显示,β-catenin蛋白水平,si-FEZF1-AS1组较si-NC组明显降低。上述研究结果表明,si-FEZF1-AS1组中的Wnt/β-连环蛋白信号传导途径被显著抑制。差异有统计学意义,P<0.01。结论:降低细胞内FEZF1-AS1的表达水平可以抑制SGC-7901细胞的增殖和侵袭,细胞的EMT过程受到抑制,其特异性机制可能与Wnt/β-连环蛋白信号传导途径有关。