进展期非小细胞肺癌患者外周血中髓源性抑制细胞比例的测定及其临床意义

来源 :中国医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:liang672369282
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目的:   随着肿瘤免疫学的发展,肿瘤微环境及其免疫抑制在肿瘤形成上作用越来越得到认可和关注;肿瘤发挥免疫抑制作用既可通过免疫抑制相关因子,也可通过免疫抑制相关细胞发挥作用;关于后者,近年来的研究取得了长足的进展,特别是髓源性抑制细胞(MDSCs)被认为是一类最重要的免疫抑制细胞,也是当今肿瘤免疫抑制研究的热点。但是,关于MDSCs在人类肿瘤发生、发展的作用和机制,以及各种治疗(包括化疗)能否减少这种细胞的抑制作用,仍然不清,有待于进一步研究。本研究在系统评价非小细胞肺癌(NSCLC)患者的细胞免疫功能和体液免疫功能的基础上,测定患者外周血中MDSCs比例的变化,以期明确MDSCs与免疫功能、临床分期的相互关系,进而明确其在肿瘤的发生、发展上的作用;同时,测定接受化疗的NSCLC患者MDSCs的动态变化,进一步了解这种细胞的影响,以及与治疗疗效的相互关系,以期明确这种细胞能否成为治疗新靶标,以及能否成为疗效判定的指标,同时为临床上适时干预提供依据。   方法:   收集2011年1月至2013年1月在中国医大四院住院且明确诊断为NSCLC病人34例,记录病人的详细病史、化验和各种检查,按照TNM分期指南分期,按照临床常规方法,使用散射浊光计免疫法测定外周血体液免疫功能(IgA、IgG、IgM,C3、 C4);使用流式细胞仪技术测定外周血淋巴细胞亚群,包括T细胞(CD3+CD4+、 CD3+ CD8+)B淋巴细胞(CD19+)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+),计算CD4+/CD8+比值;使用全自动血细胞分析仪行血常规检测(单核细胞、粒细胞、淋巴细胞计数);进行结核菌素试验测定机体细胞免疫功能(PPD);同时获取NSCLC患者和健康人对照者的外周血,用淋巴细胞分离液,密度梯度离心法分离获得单个核细胞,用流式细胞仪检测MDSCs(CD14-CD11b+CD33+)的比例,分析这种细胞与不同分期NSCLC病人的免疫功能状态的相互关系。进一步选取3例接受系统化疗的晚期NSCLC病人,在化疗前、2周期后和4周期后至少3个时间点的外周血中MDSC比例的动态变化,同时评价疗效(RECIST标准,PR部分缓解、SD疾病稳定、PD疾病进展),观察不同治疗情况下,MDSCs比例是如何变化的。此外,使用磁珠分离技术,获得晚期NSCLC病人表型为CD14-CD11b+的MDSCs,并用瑞氏-吉姆萨方法染色,观察其形态。   结果:   Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者外周血MDSCs(CD14-CD11b+CD33+)比例明显高于健康人(P<0.01);Ⅰ/Ⅱ期(术后)NSCLC患者外周血中MDSCs(CD14-CD11b+CD33+)比例较健康人升高,但差异无统计学意义(P=0.346)。Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者外周血MDSCs比例当化疗疗效评价为PR及SD时降低或平稳,当病情进展时升高。Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者外周血MDSCs比例与CD4+T细胞比例+正相关。Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者外周血淋巴细胞绝对数明显低于健康人(P<0.01);而白细胞总数、中性粒细胞绝对数、单核细胞绝对数与健康人无明显差异(P值分别为0.225、0.226、0.171)。Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者外周血IgM水平明显低于健康人(P<0.01);IgG、IgA水平较健康人无差异(P值分别为0.069、0.069);补体C3及C4水平均明显高于健康人(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者外周血中B淋巴细胞(CD19+)百分比明显高于健康人(P<0.01)、NK细胞(CD3-CD16+CD56+)百分比明显低于健康人(P<0.05);Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者CD3+T细胞百分比、CD4+T细胞百分比及CD4+/CD8+比值较健康人明显减少(P<0.01);而Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者CD8+T细胞百分比较健康人明显增高(P<0.05)。Ⅲ/Ⅳ期NSCLC患者PPD阳性率低于健康组(P<0.01)。   结论:   进展期NSCLC患者免疫功能低下;外周血中MDSCs比例明显高于早期患者和健康人,可能与肿瘤的进展相关;而且,MDSCs比例随着化疗有效而降低、随着病情进展而增高,有可能作为化疗疗效判断的辅助指标。
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