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电化学生物传感器可通过生物分子之间的特异性识别并将其他信号转化为电信号,以实现对目标物质的有效检测。因此,开发即时、灵敏、高效的电化学生物传感器检测样品意义重大。目前许多纳米材料具有高电子传递性能及良好的生物相容性,已广泛应用于生物传感的构建。核酸适配体具有合成简单、无免疫原性以及可有效识别离子靶标等特点,也已广泛应用于传感检测与分析。本论文采用纳米材料分别构建蛋白质传感器与核酸传感器,以满足不同类型的目标物质检测的需要,论文主要研究内容如下:1、基于金标银染信号放大的癌胚抗原电化学传感器的构建开发了一种新型的金标银染电化学免疫传感器,用于癌胚抗原(CEA)的检测。该传感器以Au NPs标记的聚硫堇(PTh-Au)膜修饰玻碳电极为传感检测平台,以Ag@Au连接的二抗(Ag@Au-Ab2)作为免疫标签,当所形成的免疫复合物的Ab2-Au被银染色时,该夹心型生物传感器采用阳极溶出伏安法检测银溶出信号。在优化条件下,传感器的线性校正范围为0.1-120 ng m L-1(R2=0.99856),检测限为0.055 ng m L-1。此外,该免疫测定法还具有再现性,稳定性和选择性好的优点。2、基于功能化黑磷纳米片镉离子适配体传感器构建及初步应用首先,发展了一种快速、高效地制备黑磷纳米片的新策略,采用Tween 20介导的水溶液对黑磷粉体进行液相剥离,再经过离心处理并收集分散有黑磷纳米片的上清液。表征显示:与已报道的分散液相比,Tween 20水溶液的剥离效果最好;UV-Vis进一步表明黑磷纳米片在Tween 20水溶液中具有良好的分散性。通过TEM、SAED以及Raman表征证明其结构良好。此外,还通过Ag1/Ag2=0.44>0.2即为新鲜黑磷纳米片,进一步判定该黑磷纳米片分散液具有良好的稳定性。随后,采用链霉亲和素磁珠固定随机文库,随后加入镉离子靶标进行孵育,然后经过洗脱、磁分离、乳浊PCR扩增以及单链文库的制备等步骤进行特异性结合镉离子的适配体筛选。通过9轮筛选后,将最后一轮筛选产物进行高通量测序、二级结构分析以及亲和力测定。结果显示:在高通量测序后,挑选出6条富集度最高的适配体进行分析测定,得到适配体Cd-3的Kd值最低为81.39±8.60μM。基于上述研究,制备了一种基于功能化黑磷纳米片的电化学适配体传感器用于镉离子的检测。该传感器以多聚赖氨酸功能化的黑磷纳米片(PLL-BP)和金纳米(Au NPs)作为传感界面,有效放大检测信号。以巯基引物为固定引物,镉离子适配体为识别探针,通过杂交,将适配体有效固定在电极表面,经过镉离子的竞争性结合将适配体从电极表面释放,引起传感界面的变化。在最佳条件下,采用差示脉冲法(DPV)检测,该适配体传感器的线性响应范围为0.01 n M-1μM时,线性方程为:ΔI(μA)=2.227lg C+7.696,线性相关系数R2=0.991,检测限为0.0037 n M。将该传感器用于水样的检测,结果表明,所构建的传感器具有良好的稳定性、灵敏度以及特异性。