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真菌毒素是由真菌产生的具有毒性的次级代谢产物,广泛污染农作物、食品及饲料等植物性产品,对人体和动物有严重的毒性危害。具有代表性的黄曲霉毒素(Aflatoxins/AFs, AFB、AFB2、AFG1、AFG2)及赭曲霉毒素A(Ochratoxin A, OTA)是毒性最大,同时也是最常见的5种真菌毒素,其中AFB1和OTA已分别被国际癌症研究机构(IARC)定义为Ⅰ类和ⅡB类致癌物。真菌毒素残留作为中药材微量外源性有害物质一般不表现出急毒性,但通常有较强的积蓄期,危害巨大,中药的安全性受到严重威胁。中药从田间生长以及采集后不及时干燥或贮存不当或在制备和加工过程中处理不善,均可能污染各种真菌并产生真菌毒素,从而影响中药质量和疗效。甘草是我国常用大宗药材,同时也是食品加工、轻工业的重要原料。然而,甘草在生长、加工,尤其是在储藏和流通过程中易受多种产毒真菌的污染而产生AFs和OTA,且霉变样品中AFs和OTA的检出率和含量均较高,且部分样品已超出欧盟的限量标准。本课题在前期研究的基础上,为消除甘草及相关产品的安全隐患,采用真菌学、化学和分析学等多种学科技术和方法,研究产毒真菌和甘草原药材对AFs和OTA生物合成的影响,对甘草进行了全面、深入、系统的质量评价提供基础实验依据,主要标志性成果如下：1.建立了准确、可靠和快速的同时测定甘草中五种主要有效成分(芹糖基甘草苷、甘草苷、甘草素、甘草酸和甘草次酸)含量的加速溶剂萃取(ASE)-超高效液相色谱-紫外检测器(UPLC-PDA)分析方法。并将该方法顺利运用于12批不同产地不同品种甘草样品中这5种化学成分的测定,结果并以超高效液相色谱法-时间飞行器-质谱(UPLC/ESI-Q-TOF-MS)进行确证,为化学成分复杂的中药成分分析与质量控制提供可靠保障,为指导甘草药材科学合理的应用奠定基础。2.建立了简便、准确、可靠和快速的同时测定甘草中AFs和OTA的免疫亲和柱净化(IAC)-超高效液相色谱-荧光检测器(UPLC-FLR)分析方法。通过IAC的净化富集,消除了基质干扰,达到了准确定量的目的。通过线性、准确度、精密度、重复性等条件的考察进一步对建立的分析方法进行验证,为中药质量相关管理监督部门及各相关单位提供了可靠的真菌毒素分析方法。3.探寻了AFs和OTA在甘草原药材中的累积规律及对其品质的影响,填补了现有的甘草质量评价尚未涉及产毒真菌和真菌毒素污染对其质量影响的空白,为防止中药真菌毒素污染和做好中药材的合理养护提供了科学依据。