【摘 要】
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马铃薯是重要的非谷类粮食作物。栽培马铃薯以四倍体为主,野生型多为二倍体。本研究以四倍体栽培品种Desiree（S.tuberosum）和二倍体野生型品种CP7-9（S.pinnatisectum）马铃薯组培苗为试验材料,对两种马铃薯的再生体系进行研究,并对得到的再生体系进行筛选以期创建马铃薯高效再生体系。利用获得的再生体系对Desiree以及CP7-9材料进行农杆菌介导的遗传转化试验。对遗传转化影
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马铃薯是重要的非谷类粮食作物。栽培马铃薯以四倍体为主,野生型多为二倍体。本研究以四倍体栽培品种Desiree（S.tuberosum）和二倍体野生型品种CP7-9（S.pinnatisectum）马铃薯组培苗为试验材料,对两种马铃薯的再生体系进行研究,并对得到的再生体系进行筛选以期创建马铃薯高效再生体系。利用获得的再生体系对Desiree以及CP7-9材料进行农杆菌介导的遗传转化试验。对遗传转化影响因素中的抗生素浓度、筛选剂浓度、预培养时间、共培养时间、菌液浓度、侵染时间等进行了选择。获得的最优体系如下:Desiree材料最优愈伤组织诱导培养基为:MS20+2.0 mg/L ZT+0.2 mg/L NAA+0.2 mg/L GA3,愈伤诱导率达90.0%;愈伤组织最优分化培养基为:MS20+2.0mg/L ZT+0.2 mg/L NAA+0.02 mg/L GA3,愈伤分化率达98.9%,出苗率达到97.8%。农杆菌介导的遗传转化在愈伤分化过程中噻孢霉素的最佳浓度为500 mg/L。筛选剂卡那霉素浓度为50 mg/L,最佳预培养与共培养时间都为2 d,最佳侵染时间为10 min,农杆菌侵染液浓度OD600值为0.5。CP7-9最优愈伤组织诱导培养基为:MS20+1.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA,诱导率达98.9%;适合愈伤组织分化培养基为:MS20+3.0 mg/L ZT+0.3 mg/L NAA+3.0 mg/L 6-BA,愈伤分化率达94.4%,出苗率达到44.4%。噻孢霉素的最佳浓度为400 mg/L。筛选剂卡那霉素浓度为50 mg/L,最佳预培养时间为2 d。本试验通过构建Desiree材料的再生体系和遗传转化体系为其遗传转化提供了一种方法。成功构建CP7-9材料的再生体系并得到其最适噻孢霉素浓度、筛选剂浓度以及最佳预培养时间,为本实验室CP7-9材料的遗传转化试验奠定了基础。
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