拟南芥配子体突变体KD361的分子遗传学研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:ankang1991
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植物的配子体发育是植物有性生殖的重要步骤,目前对植物配子体的发生和发育及受精过程都有了初步的认识,但是对配子体发生和发育各个阶段的分子机制及受精时雌雄配子间的融合机制还缺乏深入的认识。通过统计拟南芥幼苗卡那霉素(选择性标记)抗性与敏感性分离比,我们从Ds插入突变体库中筛选到一个分离比偏离孟德尔定律的突变体:KD361。正反交实验表明KD36K不仅影响Ds插入在雌配子中的传递,而且还影响Ds插入在雄配子中的传递。雌配子形态学和细胞学研究表明KD361雌配子出现问题发生在FG5(Female Gametogenesis 5)时期,部分突变体雌配子的两个极核在FG5末期不融合或融合延迟;雄配子形态学和细胞学的研究表明KD361的雄配子能够正常形成,但是花粉管的发育及适应性可能出现问题;此外,KD361不能形成含Ds插入的纯合体,说明KD361无法形成含Ds插入的纯合体胚胎或含Ds插入的纯合胚胎在早期致死。Ds插入位点基因克隆结果显示KD361 Ds3’端插入在At4g00380起始密码子ATG上游lbp处,Ds5’端插入在At4g00730起始密码子ATG上游1113bp处,其中因Ds插入引起了 137258bp的缺失。通过查阅文献及拟南芥基因库,我们从缺失的39个基因中筛选出一个可能引起KD361表型的基因进行研究:At4g00620。At4g00620编码一个氨基酸脱氢酶家族蛋白,参与叶酸及其衍生物的合成及代谢,该基因的等位突变体Sail720G12具有与KD361类似的表型。
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