弧菌是水域环境中的条件致病菌，WHO明确了弧菌属（vibrio spp）的危害人类的致病菌为12种，其中最常见的为：霍乱弧菌，副溶血性弧菌，溶藻弧菌。引起人类及渔业养殖动物疾病。近年来由于抗生素在环境中广泛的存在导致细菌耐药性情况日益严重，给临床治疗带来极大的困难，因此研究弧菌耐药性机制对弧菌引起的疾病预防与治疗起着重要作用。整合接合元件（Integrating Conjugative Element，ICE）最早发现于一株1992年印度爆发霍乱的流行菌株O139群霍乱弧菌，携带多种抗生素耐药基因，在整合酶作用下，以整合接合的方式在其可变区或高频插入位点携带外源基因片段进入宿主细胞染色体上，赋予宿主适应环境的抗逆性基因，也可通过排斥系统，阻止重复的ICE元件进入到宿主细胞体内，因此研究ICE在环境细菌中的分布，ICE与宿主，ICE之间的相互作用，将对环境中细菌间基因的水平横向传播提供一定的理论依据。本课题从水产品市场，养殖水体及自然水域环境等各水域环境中通过硫代硫酸盐柠檬酸盐胆盐蔗糖琼脂培养基（TCBS）培养基共分离菌株464株。选取甲氧氨苄嘧啶，链霉素，新诺明，氨苄西林，利福平，四环素，庆大霉素，氯霉素，卡那霉素，进行九种不同抗生素的药物敏感性实验，其中分离菌总体对氨苄西林耐药性最高，有49%的菌株对其有耐受性，对庆大霉素最敏感，3%的分离菌株对其有抗性。长江入海口样品中分离菌耐药性最为严重，多药抗性（MDR）菌株占71%，普陀区水产品市场样品分离菌耐药性情况较好，多药抗性菌株仅占8%。通过ICE保守基因的PCR检测在对MDR菌株进行筛选出含ICE的弧菌32株。所鉴定22株的霍乱弧菌全部且仅检测出toxR毒力基因，3株副溶血性弧菌仅检测出tlh毒力基因，1株溶藻弧菌仅检测出毒力相关基因fur及valC基因，所鉴定的霍乱弧菌全部为非O1非O139型非致病性血清型，3株副溶血性弧菌也为非致病性血清型通过使用参考文献及自行设计引物扩增ICE的5个保守位点，整合酶基因Int，转移酶基因traI，转移酶基因traC，调控基因setR，右侧边界序列attR进行PCR扩增，并进行测序和比对，结果显示本课题所研究ICE在上述五个保守位点显示出良好的保守性，其氨基酸序列与SXT/R391相似性高达97%以上。通过使用自行设计引物扩增ICE的5个可变区（variableregion，VR）及外源基因高频插入位点（hotsopt，HS）进行PCR扩增及测序比对显示本课题所研究ICE在可变区及高频插入位点均未发现携带耐药性基因，提示宿主菌耐药性基因可能位于ICE其他位点，亦有可能为其他机制所介导。本课题所研究ICE首次发现在HS4区域插入227Aa的脱氧核糖核酸酶，本课题所研究ICE在可变区及高频插入位点部分及杂合（mosaic）插入已知ICE在相应位点的序列，显示出其多样性。根据参考文献PCR扩增eex及traG基因位点，测序后进行氨基酸序列的比对分析后显示本课题所检测的15个ICE元件中7个为S型，5个为R型，3个未能确定类型，未能确定类型的ICE元件与R/S型ICE元件间的排斥类型有待进一步的研究。通过对32个含ICE的宿主菌的药物最小抑菌浓度值（MIC）的测定，选取带有合适抗生素选择性标记的供体菌与不含有ICE及质粒等可移动基因元件但对氯霉素有抗性的E.coli MG1655作为受体菌进行接合实验结果显示本课题所研究的Vp25及Vc108菌株携带的ICE可通过接合介导抗生素抗性的转移，初步验证了ICE元件在水域环境中介导抗生素抗性水平传播的功能。本课题针对初夏季节河豚鱼的大范围腐烂发病情况，采集上海地区河豚鱼养殖基地河豚病鱼，主要症状是鱼体腐烂，主要集中于腮部和尾部，且发病迅速，传播迅速。采用16s文库分析的方法，找出主要的致病菌主要为气单胞菌属，为实际生产作业的养殖户采取相应的措施提供理论基础。