2003年4月，SARS冠状病毒(SARS-CoV)被证实是引起严重急性呼吸道综合症(Severe acute respiratory syndrome，SARS)的致病因子。该病毒主要通过呼吸道及粘膜接触感染，由于其具有高度传染性和致死率，SARS-CoV感染机制及疫苗的研究具有重要意义。本论文利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统对SARS-CoV的结构蛋白S和3a蛋白之间的相互作用关系进行了研究，对SARS-CoV及蝙蝠来源的SARS-like CoV这两种不同来源的3a蛋白的功能进行了初步探讨，并将这两种不同来源的3a DNA电击免疫小鼠，对其产生的体液免疫及细胞免疫进行了初步评估，为其作为疫苗开发利用提供一定的理论依据。此外，利用杆状病毒表达系统构建的SARS-CoV的类病毒颗粒，通过腹腔注射及滴鼻免疫小鼠，对其系统免疫反应及粘膜免疫反应进行分析，并对CpG作为佐剂效应进行初步评价。　　 第一章对SARS及SARS-CoV的基本概念、研究现况与进展及其疫苗研究进行综述，并对粘膜免疫及其免疫佐剂进行了介绍。 　　 第二章作者利用Bac-to-Bac杆状病毒表达系统构建出同时表达S和3a蛋白的重组杆状病毒，对两个蛋白之间的相互作用进行研究，并通过定点突变八个半胱氨酸对其相互作用位点进行初步探讨。　　 第三章我们对来源于SARS-CoV以及蝙蝠来源的SARS-like CoV的3a蛋白进行了体外功能研究，对其信号肽、膜结构、亚细胞定位等进行了分析研究。结果表明，两种不同来源的3a蛋白均定位于细胞膜及高尔基体上；尽管在氨基酸上具有83％的同源性，但其信号肽位点，糖基化修饰等存在一定的差异。此外，通过DNA免疫小鼠，对其引起的特异性体液免疫和细胞免疫进行探讨。从结果中得知，两种不同来源的3aDNA免疫小鼠后均能产生特异性免疫应答，这为种属特异性蛋白作为疫苗研究提供一定的理论依据。　　 第四章对SARS-CoV类病毒颗粒VLP进行了系统免疫及粘膜免疫原性研究：利用杆状病毒表达系统构建、纯化类病毒颗粒，添加CpG佐剂后通过腹腔注射及滴鼻免疫小鼠，对其血清、唾液、小肠、肺脏、生殖道和粪样中的SARS-CoV特异性抗体进行检测。结果显示：通过两种不同的免疫途径免疫小鼠后均可在血清中产生相当量特异性IgG，而在滴鼻途径中产生的唾液、小肠、肺脏、生殖道和粪便分泌型IgA都明显强于注射途径。此外，笔者发现CpG佐剂仅在粪样，肠洗液及生殖道样中促进特异性IgA抗体的产生且在粪样及肠洗液存在一定的剂量效应。中和试验表明：SARS-CoV类病毒颗粒滴鼻免疫能够在血清、生殖道洗涤液中产生一定量的中和抗体，为SARS-CoV的感染提供一定的免疫防御作用。