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益生菌可改善宿主肠道微生态环境,控制肠道感染,增强机体免疫力。口服疫苗能够诱导有效的肠道黏膜免疫应答。然而,益生菌和疫苗口服时均存在因胃肠道强酸和酶的影响而失活。尽管抗原蛋白能够被有效递送到肠道,但抗原蛋白作为亲水性大分子很难通过肠道上皮的紧密连接,限制了口服疫苗的免疫效果。而将抗原蛋白携载于纳米颗粒上,能够促进其被小肠上皮中的抗原呈递细胞摄取,进一步转运至小肠淋巴器官中,发挥免疫功能。采用微包埋技术能够有效克服益生菌和抗原蛋白在胃肠道的失活问题,其中海藻酸盐微囊适合用作口服递送载体,这是因为海藻酸钠不仅具有良好的生物相容性和生物可降解性,而且海藻酸盐微胶囊具有优良的pH敏感释放特性。本论文采用海藻酸盐微胶囊将益生菌及抗原蛋白进行包埋,能起到很好的隔离保护作用,使其顺利到达肠道发挥更好的功效。首先,通过正交试验优化了海藻酸钙微胶囊的制备工艺,在最优工艺条件下,制备了嗜酸乳杆菌微胶囊和携载OVA抗原的纳微球(OVA-NPs)微胶囊。考察了不同载菌量对嗜酸乳杆菌微胶囊的影响,并且对微胶囊进行了表征,研究其在模拟胃肠环境中的释放及在小鼠体内的分布情况。采用纳米沉淀法制备纳微球,将OVA携载在纳微球表面,并采用海藻酸钙微囊对OVA-NPs进行包埋,结果显示,所制备的微胶囊球形规整,分散性好,所制备的微囊粒径在30 μm左右,适合口服递送给药。其次,研究了益生菌包埋前后对肠道微环境的免疫调节作用,结果表明,包埋后的益生菌不仅能够提高小鼠摄食量,而且大大促进了小鼠肠道上皮细胞的增殖、脾淋巴细胞的转化,并增强了脾脏巨噬细胞的吞噬能力、体液免疫水平及外周血T淋巴细胞亚群中淋巴细胞的分化。最后,研究肠道微环境调节前后,口服载OVA-NPs微胶囊的免疫效果,结果表明,肠道微环境调节后有利于提高口服免疫作用效果。与对照组相比,乳杆菌+载OVA-NPs微胶囊明显促进了黏膜IgA抗体的产生及肠道上皮细胞的增殖水平,增强了趋化因子CCL2及肠组织细胞表面分子CD11c与共刺激因子CD86的表达。综上所述,乳杆菌能够有效改善肠道微生态环境,对口服免疫具有积极的促进作用。