研究目的：1.通过对岭南慢性HBV携带者证候和体质规律的调查,获得其中医证候基本资料,探讨其中医证候规律及其基本病机。2.评价补肾祛湿方对慢性HBV携带者的血清HBVDNA定量、血清HBsAg、HBeAg定量的影响,从而验证其临床疗效。通过观察补肾祛湿方干预对慢性HBV携带者DC成熟缺陷、数量及免疫功能指标,以及细胞因子IL-10、IL-18表达水平的影响,探求其增强机体免疫、打破免疫耐受、调节Th1/Th2平衡的机制,以期为临床治疗慢性乙肝病毒携带者提供有效的中药复方,并阐明补肾祛湿方治疗慢性HBV携带者的理论依据。研究方法：1.结合专家意见,制定慢性HBV携带者证候规律和体质分型调查表,选择岭南地区六家分中心886例慢性HBV携带者分别开展中医证候规律调查及体质分型调查,对其进行辨证分析及体质辩识；2.采用随机、双盲、安慰剂对照的研究方法,选取2012年12月～2013年5月深圳市中医院门诊和住院的90例慢性HBV携带者,随机分为2组,治疗组60例,采用补肾祛湿方治疗；对照组30例,使用安慰剂治疗,在治疗前后分别检测血清HBV DNA定量、血清乙肝标志物HBsAg、HBeAg定量的变化及阴转情况,进行疗效评价,疗程48周。我们还选取了10名健康志愿者作为正常组,三组分别在治疗前和治疗48周后检测DC成熟缺陷(形态、表型分析)、数量及其分泌IL-12表达水平、细胞因子IL-10,IL-18表达水平。研究结果：1.岭南地区慢性HBV携带者证候规律和体质分型调查结果：中医证型分布规律调查结果：886例岭南地区六家分中心证型调查表中,缺失2例,有效调查表884例,各证型及出现频数所占百分比分别为：肾虚出现频数235例,占26.5%,包括肾阳虚,肾阴虚,肾气虚,肾精不足；中焦湿热126例,包括湿热内阻和肝胆湿热证,占14.2%,脾虚109例,包括脾气虚,脾阳虚,占12.3%,无证可辨的145例,占16.4%,兼夹证型140例,占17.8%,以肝胆湿热为主,其中兼夹两证13例,占1.47%,兼夹三证2例,占O.23%,兼夹四证3例,占0.34%。中医体质分型调查结果显示,岭南地区体质调查表中平和质所占比例最大,为58.69%,偏颇体质中气虚质、湿热质、肾虚质占的比例最大,分别占13.21%、5.87%、4.85%,三者共占除偏颇体质的70.2%。阳虚质占4.51%、气郁质占1.69%,痰湿质占1.58%,阴虚质占1.35%,瘀血质占1.58%,阴虚质占1.35%,淤血质占0.56%,特禀质占O.45%。2.补肾祛湿方对慢性HBV携带者临床观察①对血清HBVDNA的影响：治疗前治疗组和对照组血清HBV DNA水平分别为：7.7311gIU/ml、7.6431gIU/ml,治疗48周后,两组均值分别为6.8431gIU/ml,7.3651gIU/ml,治疗组治疗前后比较有显著统计学差异(P<0.001)；而对照组治疗前后比较无统计学差异(P>O.05),两组治疗前后差值比较有统计学差异(P<0.01)。治疗48周后,对照组和治疗组血清HBV DNA水平较治疗前下降>11gIU/ml匕例分别为：治疗组50%(29/58)、对照组24.14%(7/29),两组间相比较有统计学差异(P<O.05)。两组治疗后血清HBV DNA水平下降>21gIU/ml比例分别为治疗组25.86%(15/58)、对照组10.34%(3/29),两组间比较无统计学差异(P>0.05)。治疗48周后,两组均未见HBV DNA阴转。②对血清标志物的影响治疗前治疗组和对照组血清HBsAg定量均值分别为4.838glgIU/ml、 4.8971gIU/ml,治疗后两组血清HBsAg定量均值分别为4.1931gIU/ml、4.8631gIU/ml,治疗组治疗前后比较有显著统计学差异(P<0.001),而对照组治疗前后无统计学差异(P>0.05),两组治疗前后差值比较有显著统计学差异(P<0.01)。治疗48周后,两组HBsAg定量较治疗前下降>0.51gIU/ml比例分别为：治疗组41.38%(24/58)、对照组10.34%(3/29),两组比较统计学差异显著(P<0.01)；两组治疗后HBsAg定量>11gIU/m1比例分别为：治疗组25.86%(15/58)、对照组3.45%(1/29),两组间比较有统计学差异(P<0.05)；>2 1gIU/ml比例分别为治疗组5.17%(3/58)、对照组0.00%(0/29),两组间比较无统计学差异(P>0.05),治疗48周后,治疗组和对照组皆没有到达阴转。治疗组和对照组治疗前血清HBeAg定量均值分别为：治疗组1107.75S/Co、对照组1091.07S/Co,治疗48W后,两组血清HBeAg定量均值分别为：治疗组820.52 S/Co、对照组1075.46 S/Co,治疗组治疗前后比较,差异有显著的统计学意义(P<0.001),而对照组治疗前后差异无统计学意义(P>0.05),两组治疗前后差值比较有统计学意义(P<0.05)。③对树突状细胞成熟缺陷、表面标记物的影响及细胞因子的影响治疗前治疗组的DC成熟表面标记物A-DR、CD86、CD80和CD1 α的表达水平分别为61.32%、56.68%、43.81%、43.51%,对照组为60.09%、57.90%、43.10%、44.14%,两者的DC成熟表面标记物,明显低于健康人,有显著的统计学意义(均有P<0.01)。治疗48周后治疗组的DC成熟表面标记物-DR、CD86、CD80和CD1 α的表达水平分别为68.24%、66.98%、53.65%、54.67%,对照组为60.16%、60.62%、46.55%、45.37%,两组相比统计学差异(均有P<O.05)。治疗前后经配对资料方差分析,治疗组DC成熟表面标记物HLA-DR、CD86、CD80和CD1 α的表达水平与正常组相比,差异有统计学意义(均有P<0.05),而对照组与正常组相比无统计学意义(均P>0.05)。治疗前治疗组与对照组的IL-12表达水平分别为559.78ng/ml、557.63ng/ml,明显低于健康人,治疗48周后,两组IL-12的表达水平分别为662.02ng/ml、 565.24ng/ml,治疗前后经配对资料方差分析,两组比较有统计学差异(P<0.05)。治疗48周后治疗组IL-12的表达水平接近健康人水平(P>0.05)。治疗前治疗组和对照组IL-10均值分别为15.86 pg/ml、15.59pg/ml,均明显高于健康人,治疗48周后,两组IL-IO均值分别为12.17pg/ml、14.65pg/ml,治疗前后经配对资料方差分析,治疗组与对照组有显著统计学意义(P<0.001),治疗组与正常组相比有显著的统计学差异(P<0.001),对照组与与正常组变化相比差异无统计学意义(P>0.05)。治疗前治疗组和对照组受试者IL-18均值分别为27.97pg/ml、28.76pg/ml,两者均明显低于健康人,治疗48周后,两组IL-18均值分别为34.05pg/ml、29.61pg/ml,治疗前后经配对资料方差分析,治疗组与对照组比较有显著统计学差异(P<0.01),治疗组与正常组相比有显著统计学差异(P<0.01),而对照组与正常组相比无统计学差异(P>0.05)。研究结论：1.岭南地区慢性乙肝病毒携带者其最主要中医证型是肾虚型和湿热型,体质以气虚质、湿热质、肾虚质居多。“脾肾亏虚,湿毒内伏,正气不足,无力鼓邪外出”为其免疫耐受期中医基本病机。2.补肾祛湿方对慢性HBV携带者的HBV-DNA复制、血清乙肝病毒标志物(HBsAg、 HBeAg)的表达有一定的抑制作用,其作用的可能机制为：①通过调控DC成熟,显著上调DC成熟标志及共刺激分子,增强DC对IL-12的表达,抑制IL-IO的分泌,促进IL-18表达,协同IL-12使imDC向成熟迁移,促进DC增殖,激起HBVV特异性免疫应答,进而抑制/清除HBV；②通过促进Thl细胞因子IL-12、IL-18水平表达,抑制Th2型细胞因子IL-IO水平的表达,促使Th2型优势表达向Thl型优势转换,调节Th1/Th2之间平衡反应,进而抑制HBV。