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断奶仔猪腹泻严重威胁着我国养猪业的发展,其中F4ab/ac+大肠杆菌在断奶仔猪腹泻中占有重要地位。虽然F4受体阴性(F4R-)断奶仔猪能够降低F4+大肠杆菌引起的断奶仔猪腹泻,但目前F4+大肠杆菌对F4R-断奶仔猪免疫调节作用机理的研究仍然处于探索阶段。特定的益生菌混合制剂能够增强肠道内调节性T细胞的功能,维持肠道免疫稳态,提高抵抗病原菌侵袭能力,因此益生菌成为防治肠道细菌疾病的潜在抗生素替代品。地衣芽胞杆菌与枯草芽胞杆菌可调节肠道免疫功能,已被用于生产实践,但芽胞杆菌混合制剂与断奶仔猪肠道T细胞免疫系统之间的作用机制仍不清楚。因此,本试验用DNA为基础的Mucin 4基因多态性筛选出的32头21日龄F4ab/acR断奶仔猪并随机分四组,每组8头：1) CONT:第一周每天9：00灌服无菌生理盐水10 mL;2)ETEC:第一周每天9：00灌服无菌生理盐水10 mL,第8天9：00灌服浓度为109 CFU/mL的F4ab/ac+大肠杆菌10mL;3)LDBE:第一周每天9：00灌服浓度为3.9 ×107 CFU/mL的低剂量芽胞杆菌混合制剂10 mL,第8天9：00灌服浓度为109 CFU/mL的F4ab/ac+大肠杆菌10mL; 4)HDBE:第一周9：00每天灌服浓度为7.8 ×107 CFU/mL的高剂量芽胞杆菌混合制剂10 mL,第8天9：00灌服浓度为109 CFU/mL的F4ab/ac+大肠杆菌10 mL；记录采食量、体重。第15天,试验用猪全部麻醉后宰杀。用苏木精-伊红(H&E)染色法分析小肠炎症情况；流式细胞术分析外周血和肠道相关淋巴组织中Treg细胞亚群动态变化；ELISA法检测血清白介素10 (IL-10), IL-17A, TNF-a和IgA浓度；Real-time PCR检测T细胞相关基因在肠道的表达；试验结果表明,F4ab/ac+大肠杆菌引起了F4ab/acR+仔猪的发烧、肠炎,饲喂低剂量芽胞杆菌显著改善了F4ab/ac+大肠杆菌引起的仔猪发热,肠道炎症等症状。饲喂芽胞杆菌混合制剂能够增加血液中CD4+T细胞亚群中Foxp3-IL-10+ Treg细胞的比例升高,但Foxp3+IL-10+ Treg细胞比例并为增加。低剂量芽胞杆菌混合制剂导致了空肠中IL-6, TNF-α, IL-10以及转录因子Foxp3和T-bet mRNA表达量的增加。在肠道T细胞免疫方面,提前饲喂高剂量或者低剂量芽胞杆菌混合制剂导致了F4ab/ac+ ETEC感染的F4R仔猪上皮内淋巴细胞中CD4+ FoxP3+ Treg细胞比例的升高,或者固有层以及派伊氏结中CD4+IL-10+细胞比例的升高。其中产生IL-10的CD4+T细胞主要是Foxp3 IL-10+而不是Foxp3+IL-10+ Treg细胞。试验表明,F4ab/ac+大肠杆菌能够引起F4ab/acR+仔猪肠道以及全身性炎症反应,饲喂低剂量芽胞杆菌混合制剂能够缓解由F4ab/ac+大肠杆菌引起的F4ab/acR阴性断奶仔猪肠炎。而由芽胞杆菌混合制剂诱导的IL-10+Foxp3+ Treg细胞不能保护F4ab/acR+断奶仔猪免受F4ab/ac+大肠杆菌感染。肠道炎症过程中过度增加的CD4+IL-10+ Treg细胞可能阻止了机体对病原菌的清除。