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背景脑胶质瘤(Glioma)是最常见的颅内原发性肿瘤。由于胶质瘤细胞恶性程度高、广泛浸润性生长和高度增殖的特点导致手术难以彻底切除且手术后复发率极高。目前脑胶质瘤采用手术切除肿瘤并辅以放、化疗的综合治疗,但是治疗效果仍然较差,生存率仍然很低。失巢凋亡(Anoikis)与肿瘤的浸润侵袭和转移密切相关,是肿瘤细胞恶性进展的关键环节。作为失巢凋亡的效应分子,Bit1(bcl-2 inhibitor of transcription 1)在细胞与周围细胞或细胞外基质脱离黏附时可诱发一种非caspase途径依赖的细胞凋亡。且研究显示Bit1在不同肿瘤组织中的作用存在组织差异性,可促进或抑制肿瘤的生长。而Bit1对脑胶质瘤的恶性生物学活性的调控作用尚未见报道。本研究旨在通过体内体外实验和临床组织标本分析,探讨Bit1在胶质瘤中的表达情况及其对肿瘤恶性生物学活性的影响。目的探究Bit1在脑胶质瘤组织和细胞中的表达情况,构建Bit1稳定沉默的胶质瘤细胞系,检测Bit1稳定沉默对体外胶质瘤细胞增殖、凋亡、侵袭及迁移等生物学活性的影响及体内裸鼠皮下移植瘤增殖及凋亡能力的影响。方法1.收集临床不同恶性级别的脑胶质瘤组织及正常脑组织标本,分别采用荧光定量PCR技术和Western blot及对组织标本中Bit1的表达水平进行检测,观察Bit1在脑胶质瘤组织中的表达情况。2.采用荧光定量PCR技术和Western blot检测胶质瘤细胞系U251、U87、SHG44、LN229、A172和正常脑胶质细胞HEB中Bit1的表达情况,通过慢病毒载体将Bit1的干扰的质粒导入胶质瘤细胞系U87细胞中,通过筛选建立稳定沉默Bit1的胶质瘤细胞株。3.分别采用MTT实验、流式细胞术、Transwell侵袭和迁移实验检测Bit1沉默细胞系增殖、凋亡、侵袭及迁移能力变化。4.分别采用裸鼠皮下成瘤实验、TUNEL实验检测Bit1沉默细胞系在体内的成瘤能力及凋亡能力变化。结果1.Bit1 mRNA和蛋白的表达水平在不同级别的脑胶质瘤组织中均低于正常对照脑组织,随着脑胶质瘤(WHO分级)恶性级别的升高,表达水平逐渐降低,差异有显著统计学意义(P<0.01)。2.在各个脑胶质瘤细胞系中Bit1 mRNA和蛋白的表达水平均低于正常对照脑胶质细胞系HEB,差异有统计学意义(P<0.05),且与其他脑胶质瘤细胞系相比,Bit1在U87胶质瘤细胞系中呈现相对较高的mRNA和蛋白表达水平。3.体外细胞实验:Bit1表达沉默以后,脑胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力增强,细胞的凋亡能力降低,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。4.体内动物实验:Bit1表达沉默以后,裸鼠皮下移植瘤生长显著增强,凋亡能力降低,差异均有显著统计学意义(P<0.05)。结论1.Bit1在脑胶质瘤组织和细胞中呈低表达,且与肿瘤恶性程度密切相关。2.Bit1表达沉默后使体外胶质瘤细胞的增殖、侵袭和迁移能力增强,凋亡能力降低。3.Bit1表达沉默后促进体内裸鼠皮下移植瘤的生长,抑制其凋亡。