新城疫病毒诱导人NK细胞杀伤肿瘤效应的体外研究

来源 :华北煤炭医学院 河北联合大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:zxz6381
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研究新城疫病毒(NDV)和紫外线灭活的新城疫病毒(NDV-UV)在体外诱导人外周血自然杀伤细胞(NK)的杀瘤作用,并对NDV和NDV-UV对肿瘤细胞的直接杀伤细胞(NK)的杀瘤作用,并对NDV和NDV-UV对肿瘤细胞的直接杀伤作用、致肿瘤细胞凋亡作用和诱导人外周血单核巨噬细胞(Mφ)的杀瘤作用进行探讨.方法:用NDV和NDV-UV作用于喉癌细胞株Hep-2细胞,每隔24小时用MTT法测定病毒的杀瘤活性并测定培养上清液的血凝效价,以比较不同时间点两者对Hep-2细胞的直接杀伤作用和NDV的血凝效价.在光学显微镜下观察染毒72小时的Hep-2细胞形态变化以及提取染毒72小时的Hep-2细胞DNA,进行DNA电泳以了解Hep-2细胞的凋亡情况.用淋巴细胞分离液从外周血中分离单个核细胞,经贴壁粘附法去除Mφ,尼龙毛柱去除B细胞,补体裂解法去除T细胞,得到富集的NK细胞后,用NDV和NDV-UV分别诱导NK细胞16小时作为效应细胞,K562细胞和Hep-2细胞作为靶细胞,共同作用8小时(效靶比分别为20:1、10:1和5:1),然后用MTT法测定NK细胞杀瘤活性.同法将贴壁粘附法得到的Mφ分别用NDV和NDV-UV诱导,Hep-2细胞作为靶细胞,效靶比为50:1,用MTT法测定Mφ的杀瘤活性,并进一步比较NDV和NDV-UV对NK细胞和Mφ细胞杀瘤活性的影响.结论:NDV和NDV-UV能在体外诱导人外周血NK细胞和Mφ,使之杀瘤活性增强,NDV的诱导作用较NDV-UV强;NDV和NDV-UV能直接杀伤肿瘤细胞,NDV能在肿瘤细胞内复制并引起肿瘤细胞凋亡,而NDV-UV不能在肿瘤细胞内复制,提示NDV的杀瘤作用并不完全依赖于病毒的复制,在病毒与肿瘤细胞作用48小时后,NDV的杀瘤活性高于NDV-UV.NDV-UV可作为安全有效的生物调节剂用于肿瘤的生物治疗.
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