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目的：用弓形虫基因II型虫株PRU株和本实验分离得到的Chinese1型成囊株分别感染体外分离培养的大鼠腹腔巨噬细胞,观察不同基因型弓形虫诱导大鼠腹腔巨噬细胞表达精氨酸酶的通路和机制。 方法：将体外培养的原代大鼠腹腔巨噬细胞感染弓形虫typeII基因型PRU株和Chinese1基因型TgCtwh6株,检测Arg-1的表达;用siRNA分别沉默参与Arg-1基因转录的转录因子Stat6和C/EBPβ,并检测沉默效率。沉默48h后感染PRU株和TgCtwh6株,按照各实验时间点收集RNA和蛋白标本,检测Arg-1基因的表达。将体外培养的原代大鼠腹腔巨噬细胞用地塞米松诱导12h后,检测Arg-1的表达和上清NO的合成。在地塞米松作用12h后感染PRU株和TgCtwh6株,继续用含地塞米松的培养基的培养,按照实验时间点收集RNA和蛋白质,检测Arg-1的表达。 结果： (1)体外培养的原代大鼠腹腔巨噬细胞感染弓形虫typeII基因型PRU株和Chinese1基因型TgCtwh6株,Arg-1在mRNA水平和蛋白水平均有表达; (2)siRNA沉默下调Arg-1基因转录的转录因子STAT6和C/EBPβ,沉默效率为50％-60%。巨噬细胞经siRNA转染,沉默STAT6和C/EBPβ48hr后,分别感染PRU株和TgCtwh6株。结果PRU感染组中,STAT6沉默后Arg-1表达无明显改变,而C/EBPβ沉默的巨噬细胞内Arg-1表达显著下调;TgCtwh6感染组中,STAT6沉默的巨噬细胞内Arg-1表达明显下调,而C/EBPβ沉默的巨噬细胞Arg-1表达无明显变化。 (3)将体外培养的原代大鼠腹腔巨噬细胞用地塞米松诱导培养,12h后细胞Arg-1的表达和NO的产生均显著下降。此后将上述巨噬细胞分别感染PRU株和TgCtwh6株,结果显示Arg-1的表达受到抑制。 结论： 1.弓形虫typeII基因型PRU株和Chinese1基因型TgCtwh6株通过不同的途径使巨噬细胞表达Arg-1。提示PRU株感染可诱导经典途径活化的巨噬细胞(classic allyactivated macrophage,CAM,M1)Arg-1,此途径不依赖于STAT6而依赖C/EBPβ;相反,TgCtwh6株感染可能诱导旁路途径活化的巨噬细胞(alternatively activated macrophage,AAM,M2)Arg-1,此途径依赖于Stat6。 2.地塞米松可以明显抑制大鼠腹腔巨噬细胞NO的合成和Arg-1的表达;大鼠腹腔巨噬细胞经地塞米松诱导后感染typeII基因型PRU株和Chinese1基因型TgCtwh6株,地塞米松均可显著抑制Arg-1的表达。