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目的:通过敏感的测序方法检测配对的原发和转移性结直肠癌的基因突变,明确基因突变的状态和异质性。方法:采用二代测序(Next-Generation Sequencing,NGS),实时定量 PCR(quantitative RT-PCR,qPCR)和Sanger测序法检测65个患者中147个原发和配对的肝或肺转移性结直肠癌(metastatic colorectal carcinoma,mCRC)标本中EGFR、KRAS、NRAS、PIK3CA、ERBB2、BRAF、KIT 和 PDGFRA 基因突变状态。结果:15例(15/22,68.2%)肺转移性结直肠癌和13例(13/20,65%)肝转移性结直肠癌与原发肿瘤在KRAS、NRAS或BRAF的突变一致。全部检测的基因中,11例(11/22,50%)肺转移和11例(11/20,55%)肝转移性结直肠癌与原发肿瘤的突变有差异。KRAS和BRAF突变在肺转移病灶中多于原发病灶(分别为 P=0.004 和 0.003)。KRAS、NRAS、BRAF和PIK3C 突变在肺转移灶中也明显多于肝转移灶(分别为86.7%和44%,P<0.001)。NGS还检测出一些在qPCR检测范围外的新的突变。结论:这项研究显示采用NGS检测基因突变状态在原发和转移性结直肠癌中的不一致性较高。临床应用中应同时检测原发和转移灶的基因突变状态。目的:研究与T1期直肠癌淋巴结转移相关的临床病理因素,为临床医生选择适当的治疗方式及判断预后提供依据。方法:本研究选取根治性手术切除的连续性T1期直肠癌病例,分析相关组织病理学指标:包括患者的性别、年龄、肿瘤大小、黏膜肌状态、肿瘤浸润深度、肿瘤大体类型、是否有腺瘤背景、腺瘤的类型、肿瘤分化程度、肿瘤组织学亚型、低分化肿瘤细胞簇(poorly differentiated clusters,PDC)、肿瘤出芽(tumor budding,TB)、淋巴管血管侵犯(lymphovascular invasion,LVI)、静脉侵犯(venous invasion,Ⅵ)、神经侵犯(perinural invasion,PNI)、坏死、肿瘤浸润最深处的腺体形态等与淋巴结转移、远处转移和生存的关系。结果:共计251例T1期直肠癌根治性手术患者用于研究。其中男性123例,女性128例,中位年龄60岁。其中28例有淋巴结转移,淋巴结转移率11.2%。3年、5年和10年的总生存率分别为98.6%、96.8%和94.9%。有淋巴结转移的病例3年、5年和10年的总生存率分别为100%、95.6%和90.9%;无淋巴结转移的病例3年、5年和10年的总生存率分别为99%、96.9%和95.4%,高于有淋巴结转移组,但无统计学差异。单因素分析显示患者的年龄(P=0.05)、腺瘤背景(P<0.01)、组织学分化(P<0.01)、筛状结构(P=0.03)、低分化肿瘤细胞簇(P=0.02)、肿瘤出芽(P=0.01)、淋巴管血管侵犯(P<0.01)、粘膜下静脉侵犯(P<0.01)、浸润深部腺体类型(P=0.04)和GADD45B表达(P=0.04)与淋巴结转移有关。多因素logistic回归分析显示患者年龄(P=0.02)、腺瘤背景(P<0.01)、组织学分化(P=0.04)、黏膜下静脉侵犯(P=0.02)和GADD45B表达(P=0.01)是淋巴结转移的危险因素。单因素分析显示肿瘤浸润最深处的腺体为开放型与淋巴结转移相关(P=0.04)。腺体的开放型还显示与肿瘤大体平坦型(P=0.03)、无腺瘤背景(P=0.03)、黏膜肌完全消失(P=0.05)、高级别肿瘤出芽(P<0.001)和肿瘤内坏死(P<0.001)有关。结论:本项研究不仅验证了多种已知的组织学特征与T1期直肠癌淋巴结转移的相关性,而且还提出了筛状结构、腺体为开放型和GADD45B表达降低者与淋巴结转移相关的指标。