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当人体存在营养不良状况时就有可能会导致机体产生疾病。前白蛋白(Prealbumin,PA)和骨特异性碱性磷酸酶(Bone alkaline phosphatase,BAP)分别作为检测蛋白质-能量营养和骨钙营养状况的特异性生化指标,能够稳定并准确地监测人体的营养状况。本文通过对免疫层析方法实验参数的优化,旨在建立快速定量检测人血清中PA和BAP的两种荧光免疫层析方法,并将建立的方法推广应用于临床,为人体营养状况的监测提供可靠的数据。本研究采用双抗夹心原理,建立了定量检测血清中PA的荧光免疫层析方法。根据试纸条检测线(T线)和质控线(C线)的荧光强度的比值(FIT/FIC)与样本中PA浓度成正比,从而实现定量检测。实验对抗PA单克隆抗体和多克隆抗体进行了配对筛选。通过EDC一步介导法制备荧光微球-抗PA单克隆抗体标记物,并对标记过程中以及试纸条制备中的实验参数进行了优化,选择最优的实验条件检测样本中PA的含量。免疫层析试纸条的检测限为1.0 ng/m L,20 min内就能得到检测结果,在8.0 ng/m L~110.0 ng/m L浓度范围内有很好的线性关系(R2=0.998);与血红蛋白、白蛋白等没有明显交叉反应,特异性较好;加标回收实验的变异系数均在10%以内,重复性良好;将本方法与免疫比浊法进行了方法学比较,结果显示两者的相关系数为0.94。实验结果说明建立的PA荧光免疫层析试纸条具有灵敏、特异、省时等特点。本研究还建立了基于荧光微球的竞争抑制免疫层析试纸条方法用于定量检测血清中的BAP。实验中以FIT/FIC值为参考指标,对BAP免疫层析试纸条方法的实验条件进行了优化,在最佳实验条件的基础上对试纸条进行了评价,结果显示:试纸条的检测时间为15 min,灵敏度为0.1 ng/m L,在0.1 ng/m L~250 ng/m L范围内具有很好的线性关系(R2=0.997),说明试纸条具有较好的灵敏度和线性范围,免疫层析试纸条方法和化学发光法的检测结果显示两者的相关系数为0.771。临床营养学监测人体的营养状况一般都耗时比较长,需要昂贵的仪器。免疫层析试纸条方法有操作简便、准确度高、快速且价格低廉等优点,有较高的应用价值。