HCV NS3/4A丝氨酸蛋白酶表达细胞系和重组细胞凋亡酶-3的构建及其应用的研究

来源 :中国人民解放军空军军医大学 | 被引量 : 1次 | 上传用户:zkhe
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丙型肝炎是由丙型肝炎病毒(HCV)引起的传染性疾病,是慢性肝病的主要原因之一。全球范围内HCV感染人数达1.7亿,我国约4000多万人,HCV感染已成为严重的世界公共卫生问题之一。迄今尚无疫苗和特异有效的治疗药物。 鉴于蛋白酶和逆转录酶抑制剂在治疗HIV方面取得良好疗效,以蛋白酶和RNA聚合酶为靶标寻找特异有效的治疗药物已成为HCV感染防治研究的重要方向之一。缺乏可靠的细胞培养系统和小动物实验模型,极大地阻碍了抗HCV药物的筛选,因此以酶分子为靶位的测定系统常作为药物筛选的替代系统。由于候选药物分子必须具有易进入细胞、稳定性好等特征,建立一种细胞水平上酶活性的测定系统对于筛选抗HCV药物无疑有着重要意义。 NS3/4A丝氨酸蛋白酶在多聚蛋白前体加工成熟中起着关键的作用,是抗HCV的主要靶标。鉴于NS3/4A丝氨酸蛋白酶晶体结构、生化特性和切割水解底物的特征,以及细胞凋亡酶3(caspase-3,简写为Casp3)的结构特征和活化方式已经明确。本研究依据Casp3是哺乳动物细胞中重要的凋亡执行分子之一,它的活化必然会引起细胞的凋亡。将
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