【摘 要】
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当前，植物细胞程序性死亡(programmed cell death，PCD)已成为植物学的研究热点之一。CED-9是发育PCD的负调控基因，本课题将CED-9基因通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)
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当前，植物细胞程序性死亡(programmed cell death，PCD)已成为植物学的研究热点之一。CED-9是发育PCD的负调控基因，本课题将CED-9基因通过根癌农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)EHA105介导转化烟草和水稻，获得以下结果： 1．从质粒pBS中获取CED-9基因片段，构建中间载体pGEM-ced9以获得合适的酶切位点。在此基础上再构建重组表达载体pBI-ced9，将CED-9基因置于CaMV35S启动子控制之下。然后以pBI121为对照组，通过根癌农杆菌EHA105的介导，将CED-9基因导入烟草叶片组织中，通过两轮抗性筛选，得到抗卡那霉素(Km)的再生植株。对所得到96株再生苗进行PCR检测，结果表明，阳性苗比例为34％。Southern点杂交结果显示，目的基因确已整合到烟草基因组中。 2．通过水稻幼胚诱导愈伤，并建立了水稻悬浮细胞系，为转基因提供了良好的受体材料。构建了用于水稻中表达的载体pCA-ced9，通过农杆菌EHA105转化导入水稻愈伤组织和水稻悬浮细胞，经潮霉素(Hym)筛选，以期望获得抗性植株，目前该工作仍在进行中。
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