【摘 要】
：
保守转录因子LEAFYs（LFYs）对陆生植物的生长发育具有重要作用。Rice FLO-LFY Homolog（RFL）是水稻（Oryza sativa L.）中的LFY同源物,它与LFY具有相似的蛋白结构域,但功能却发生了分化。拟南芥中LFY主要参与花发育过程,而水稻RFL不仅参与花发育过程,还对株型、叶型、穗型、开花时间等方面具有明显的控制作用。rfl突变体在营养生长阶段呈现植株矮化、叶片短小
论文部分内容阅读
保守转录因子LEAFYs（LFYs）对陆生植物的生长发育具有重要作用。Rice FLO-LFY Homolog（RFL）是水稻（Oryza sativa L.）中的LFY同源物,它与LFY具有相似的蛋白结构域,但功能却发生了分化。拟南芥中LFY主要参与花发育过程,而水稻RFL不仅参与花发育过程,还对株型、叶型、穗型、开花时间等方面具有明显的控制作用。rfl突变体在营养生长阶段呈现植株矮化、叶片短小、叶间隔期缩短、叶数增多、高位分蘖、茎秆髓腔变小甚至消失等多种表型,而在lfy突变体未报道类似的突变表型。LFYPro:RFL不能完全互补lfy的突变表型,且在拟南芥中分别超表达RFL和LFY,两者的转基因植株表型也不完全相同,表明RFL与LFY蛋白存在功能差异。目前关于RFL多效功能分化的分子机理还不清楚。本研究从筛选RFL的互作因子及鉴定其功能入手,探究RFL互作因子对RFL功能分化的作用。实验首先利用酵母双杂交（Y2H）方法筛选互作因子,通过Pull-down方法验证RFL和候选因子的互作关系。其次,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术对验证后的互作因子进行基因敲除分析。同时,分析互作因子蛋白亚细胞定位。从而确定其生物学功能及与RFL的相关性。本研究取得以下主要结果:（1）建立了营养生长不同时期的茎尖和生殖转型后不同时期幼穗组织的c DNA文库,利用Y2H技术筛选获得45个候选RFL互作因子。（2）通过Y2H验证了Os CCHC10、Os ICE2的全长蛋白能够与RFL互作。利用转基因水稻提取的RFL:3×FLAG植物蛋白,与原核表达的候选因子融合蛋白进行体外Pull-down验证,证实了Os CCHC10、Os DIP1与RFL存在互作关系。（3）利用水稻原生质体瞬时转化系统进行候选互作因子的亚细胞定位分析,结果显示:Os DIP1、Os CCHC10、Os ICE2三者均定位于细胞核中。（4）利用CRISPR/Cas9技术在ZH11背景中对Os DIP1、Os CCHC10、Os ICE2三个基因进行敲除,分别获得了多个独立敲除体。其中,Os DIP1敲除突变体植株无异常表型。敲除Os CCHC10的T0植株及其后代种子分离群体均不存在双等位基因功能完全丧失的敲除体,且分离比显示,Os CCHC10功能丧失导致的致死效应可能发生在合子或胚胎/胚乳发育过程。而敲除Os ICE2则呈现幼苗致死效应。osice2纯合或双等位功能丧失敲除体幼苗,其茎尖分生组织大小和胚胎时期形成的3个幼叶/叶原基与野生型均无明显差异,但后续不能长出新叶,导致幼苗停滞在3叶期,最终死亡。现有研究表明RFL参与控制各类分生组织的分化进而影响水稻形态建成,而本研究鉴定的RFL互作因子基因Os CCHC10、Os ICE2突变后的表型均与细胞分化相关联。因此,推测Os CCHC10、Os ICE2通过与RFL互作,分别赋予了RFL控制合子或胚胎/胚乳发育的功能以及胚后阶段幼苗发育的功能。本研究结果为了进一步揭示RFL多效性功能分化的分子机制奠定了基础。
其他文献
辣椒（Capsicum spp.）是一种重要的蔬菜和调味品。辣椒在世界各国都有栽培,其中中国是栽培面积最大的国家。但由于辣椒并非我国原产,国内辣椒遗传基础较为狭窄,尤其缺乏优质抗病抗逆的材料,利用目前现有的栽培品种较难在育种上取得突破性的进展,所以迫切需要引入野生辣椒资源。染色体单片段代换系是研究重要农艺性状分子遗传基础的重要材料。目前已构建染色体片段代换系的大多集中在大田作物中,例如水稻、玉米、
肉鸡肺动脉高压综合征（pulmonary hypertension syndrome,PHS）是一种常发生于快速生长肉鸡的营养代谢性疾病。由于其发病原因复杂,难以单纯通过饲养管理防控。该病病初无明显症状,被发现时通常已接近出栏日龄,由此造成严重损失。通过控制肉鸡的生长速度可以预防PHS,但有悖于高效生产的原则。所以寻找一种安全、有效的防治药物成为迫切需要。我国传统医学已发展多年,具有独特的知识体系
螟黄赤眼蜂Trichogramma chilonis是防治害虫的优良蜂种,短管赤眼蜂Trichogramma pretiosum是完全感染Wolbachia并行孤雌产雌的品系。本实验采用高温胁迫的办法对螟黄赤眼蜂和短管赤眼蜂进行处理,研究了高温持续胁迫（全世代胁迫）和短期胁迫（幼虫期胁迫24h后恢复至正常温度）下,两种赤眼蜂生长发育及繁殖的变化;同时,对高温持续胁迫多代后短管赤眼蜂体内Wolbac
MSTN是控制肌肉生长的负调控因子,也是近些年重点研究的影响畜禽瘦肉率、改善肌肉品质的重要调控基因。Mef2C基因属于Mef2家族,参与骨骼肌肌纤维形成,且促进慢肌纤维的形成。为获得肉质鲜美且能稳定遗传表达的转基因鸡,本实验采用CRISPR/Cas 9基因编辑技术,构建MSTN基因Cas 9敲除载体、MEF2C基因的g RNA-Cas9插入真核表达载体和Mef2C基因打靶载体,从细胞水平到动物个体
本文采用高效液相色谱-质谱串联法（HPLC-MS/MS）通过建立24%盐霉素预混剂在肉鸡组织样品（肝脏、肾脏、皮脂、肌肉）的残留检测方法,对其在肉鸡体内的残留消除进行研究,并对该预混剂在SD大鼠的慢性毒性进行评价。选取240只健康的SPF级SD大鼠,雌雄各半,体重50～70 g,随机分为空白对照组（0 mg/kg·bw）、低剂量组（3 mg/kg·bw）、中剂量组（9 mg/kg·bw）、高剂量组
生物炭肥具有减缓肥料养分释放速率,改善土壤环境和减轻农田病虫害等诸多优点,同时,将生物炭与传统化肥复合制备生物炭肥既能解决生物质资源浪费严重的问题,又能减少传统化肥使用量,实现农业生产过程的节能环保。本文以稻壳生物炭、尿素为原料,通过不同成型方式制备了三种具备缓释效果的新型稻壳炭基尿素肥。通过研究成肥工艺/技术参数对稻壳炭基尿素肥成型、养分释放性能和内部结构的影响,探讨稻壳炭与尿素之间的成型机制和
由于抗生素在畜牧业及食品生产中持续性以及预防性或过度使用,使得细菌为了克服抗生素的治疗效果而不断的发生突变进而造成细菌耐药性的产生以致于形成多重耐药菌。而由细菌严重耐药造成的各类疾病的感染率正在继续上升,因此细菌耐药已逐渐对全球的生物群体健康产生了严重的威胁。近年来,随着无抗养殖的号召在行业里得到越来越多人的认可,作为抗生素的有效替代选择---噬菌体的应用逐步受到重视。与此同时,目前人工改造噬菌体
紫锥菊（Echinacea purpurea（L.）Moench）原产于北美洲,具有较高的药用价值和观赏价值,目前世界各地区均有引种。另一方面,多倍体植物常常具有生物量大和抗性强等优点,而三倍体是倍数最低的多倍体,在多数情况下表现优于更高倍数的多倍体。本研究通过对3个紫锥菊二倍体株系及其加倍的四倍体进行种植比较,观察其加倍效应,并在此基础上,以不同株系的二倍体和四倍体作为亲本进行杂交,根据杂交结果
神经生长因子（Nerve growth factor,NGF）是一种能促进神经元细胞增殖和分化的蛋白。提取自小鼠唾液腺的鼠源神经生长因子（mouse NGF,m NGF）在我国已被批准作为药物用于治疗人神经退化及损伤类疾病。m NGF虽然与人神经生长因子（human NGF,h NGF）同源性很高,但它在人细胞中的生物活性显著低于h NGF,且其作为药物用于人类临床治疗仍然存在免疫原性问题。因此,
水稻和小麦、玉米并称世界三大粮食作物,在世界粮食生产中有举足轻重的地位。水稻是中国主要粮食作物之一,目前,中国的水稻产量居世界第一位。小区试验育种是培育优良品种的重要方法,而目前我国水稻小区育种方式比较落后,机械化程度低,以人工育种为主,效率低,成本高,因此,急需发展现代化的小区育种机械。本文针对水稻小区育种的播种需求,以华南农业大学已研制成功的水稻气力式精量排种器为基础,设计了一种适合水稻小区育