论文部分内容阅读
目的：将葡聚糖降解后与透明质酸接枝反应合成葡聚糖接枝透明质酸共聚物，研究合成材料的生物相容性，探讨其作为皮肤敷料的应用前景。方法：甲酸降解β‐1，3‐D葡聚糖后，采用环氧氯丙烷活化葡聚糖，与透明质酸反应合成葡聚糖接枝透明质酸。比较机械搅拌与超声震荡的活化效率；采用FT-IR、13C-NMR对葡聚糖接枝透明质酸的化学结构进行表征；元素分析检测葡聚糖接枝透明质酸的接枝率；扫描电镜观察葡聚糖接枝透明质酸支架的形貌。将葡聚糖、葡聚糖接枝透明质酸与成纤维细胞（3T3）共培养，使用cck-8检测细胞毒性；将葡聚糖、葡聚糖接枝透明质酸涂膜于玻片上，接种成纤维细胞，在光学显微镜下观察细胞粘附情况；将材料与巨噬细胞进行共培养，提取细胞的TNF‐α、IL‐1和IL-6的mRNA，经过PCR逆转录后，使用Real-time PCR检测三个因子相关DNA的含量。通过小鼠皮下降解试验分析材料的生物相容性和降解性能；小鼠皮肤创伤修复试验探讨材料促进皮肤伤口愈合的作用，使用HE染色从细胞水平进行分析。结果：使用甲酸降解葡聚糖，得到纯度为99.55%的葡聚糖。采用FT-IR13、C-NMR、元素分析证实葡聚糖接枝透明质酸成功合成，且透明质酸的接枝率为76%。核磁分析得出透明质酸主要接枝在葡聚糖的C4和C6羟基上。通过SEM观察形貌得出葡聚糖接枝透明质酸支架表面有一定粗糙度，适合与生物组织粘附。通过细胞毒性实验结果表明材料在20mg/ml的浓度范围内没有细胞毒性。通过细胞粘附试验得出成纤维细胞可以在材料上正常增殖。小鼠皮下降解试验表明接枝透明质酸后其降解性能明显增加，且葡聚糖接枝透明质酸的降解速度随透明质酸增加而增大。通过小鼠创伤修复试验表明葡聚糖、葡聚糖接枝透明质酸都能够促进皮肤伤口愈合，葡聚糖接枝透明质酸更佳。这些表明葡聚糖接枝透明质酸作为皮肤敷料有较好的应用前景。