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研究背景与目的PIK3CA基因在多种肿瘤中扮演癌基因的角色,该基因编码的蛋白磷脂酰肌醇-3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinases,PI3K)在细胞生长、凋亡及肿瘤的形成过程中起重要的作用。功能及遗传学研究显示,PIK3CA基因是一个癌基因。在多种人类实体瘤中存在PIK3CA基因的突变。近来多篇报道指出PIK3CA基因在包括结肠癌、卵巢癌、乳腺癌、胃癌、肝癌等多种肿瘤中发生高频体细胞突变。PIK3CA的变异是多种实体肿瘤发生发展的关键步骤。PIK3CA基因的突变导致PI3K信号途径在不同水平发生调控异常,最终无限制的促进细胞生长和繁殖,并抑制细胞凋亡,导致肿瘤发生。PIK3CA基因突变是乳腺癌中最常见的基因突变之一。乳腺癌中PIK3CA基因突变的频率在8%-40%之间。其突变80%～90%聚集在该基因的第9外显子和第20外显子,分别对应该酶的螺旋区和激酶区。它的这种非随机高频突变显示了在肿瘤发生中的重要意义。鉴于相当一部分单核苷酸多态性(SNP)的频率在不同民族、人群有显著差异,而中国妇女乳腺癌中PIK3CA的突变情况研究目前少见报道。因此本研究旨在检测中国妇女乳腺癌组织中PIK3CA基因两个热点突变区域第9外显子和第20外显子的突变,研究该突变与乳腺癌临床病理特征之间的关系。材料与方法1.标本收集:45例原发性乳腺癌的冰冻组织标本,取自长海医院2006年1月至7月收治患者,均在-80℃条件下保存,所有病例均经病理学确诊。另取10例对照标本,为其他乳腺良性肿瘤患者经手术切除后的组织冰冻标本。研究对象均获知情同意。2.实验方法:45例乳腺癌标本提取DNA后,对第9及第20外显子进行PCR扩增,产物纯化后测序。10例乳腺良性肿瘤组织标本同样测序作为对照。3.统计学分析:采用SPSS13.0统计软件进行分析,P<0.05表示差异有统计学意义。实验结果1.在45例乳腺癌组织标本中共发现14例(31%)PIK3CA基因突变,其中第9外显子8例(57%),第20外显子6例(43%)。在第9外显子突变中,1例为C1616G(P539R),1例为G1633A(E545K),6例为A1634C(E545A)。第20外显子的6例突变均为A3140G(H1047R)。10例良性肿瘤对照中均未发现突变。2.第9与第20外显子突变在浸润性导管癌和浸润性小叶癌中的分布无显著差别。PIK3CA基因突变与患者年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、ER/PR状态、HER2表达、P53表达之间无明显相关性。实验结论1.在本研究中,PIK3CA基因第9外显子与第20外显子两个热点突变区域在中国女性乳腺癌患者中均有突变,31%的突变频率与此前报道的PIK3CA基因在乳腺癌中8-40%的突变频率相符。提示PIK3CA基因可能与中国女性乳腺癌的发生、发展及预后相关。2. PIK3CA基因突变与乳腺癌临床病理特征如患者年龄、肿瘤大小、淋巴结状态、ER/PR状态、HER2表达、P53表达之间无明显相关性。