前言 持续性心肌缺血可使细胞发生缺血性损伤,恢复血液再灌注,可使可逆性缺血损伤加重,或使其转化为不可逆性损伤,这种现象称为心肌缺血再灌注损伤(MIRI)。目前,MIRI已成为阻碍缺血心肌从再灌注疗法中获得最佳疗效的主要难题。故探索具有良好保护作用的药物尤为重要。 本实验欲通过大鼠的心肌缺血/再灌注(I/R)损伤模型,观察腺苷对在体大鼠心肌缺血再灌注损伤的保护作用,探讨其可能的作用机制。 材料和方法 选健康Wister大鼠42只,体重250g±30g,雌雄各半,按随机化原则分成3组。Ⅰ组14只为假手术组,Ⅱ组14只为对照组,Ⅲ组14只为腺苷组。制作心肌缺血/再灌注(I/R)模型。假手术组:完成模型操作,只穿线不结扎冠状动脉。腺苷组:完成模型操作,穿线结扎冠状动脉30分钟,再灌注45分钟,缺血前1分钟予腺苷(0.4ml/kg)左心室内注入。对照组:完成模型操作,穿线结扎冠状动脉30分钟,再灌注45分钟,于结扎前1分钟予等量生理盐水左心室注入。于实验结束后,每组随机抽取2只,留作制备病理切片,其余36只观察其它指标。(一)缺血30分钟,再灌注45分钟后立即处死,取下心脏,迅速剪下缺血区组织约0.1g在冰冷生理盐水中漂洗,除去血液,滤纸吸干,放入1.5ml塑料离心管中,置-70℃冰箱中保存。实验结束后,将全部标本取出制作10%心肌组织匀浆,离心后取0.5ml上清液备用。(二)每组随机抽取两只于实验结束后,立即处死,取下心脏,于生理盐水中漂洗,除去血液后,迅速放入4%甲醛中固定。从心尖始以间距为0.3cm横向连续切片至冠脉穿线处,石蜡包埋切片,编号备用。