本文从以下几个方面进行论述：　　第一部分 RARs在缺氧性RTEC损伤中的表达及意义　　目的:通过检测缺氧性损伤的肾小管上皮细胞(renal tubular epithelialcell，RTEC)中维甲酸受体（retinoic acid receptors，RARs）的表达及细胞损伤指标的变化，探讨RARs在缺氧性RTEC损伤中的意义。　　方法:将体外培养的RTEC随机分成3个组:对照组(control group，control)，缺氧损伤48小时组(hypoxia/reoxygenation for48 hour group，HR48)和缺氧损伤72小时组(hypoxia/reoxygenation for72 hour group，HR72)。control组细胞常规置于37℃，5％CO2+95％空气的二氧化碳培养箱中培养。HR组细胞置于缺氧小室中，通入含5％CO2+95％N2的缺氧混合气体，密封并置于37℃生化培养箱内。分别于缺氧48小时和72小时后将两组细胞置于二氧化碳培养箱内进行1小时复氧处理，最后收集三组细胞行相关指标检测。实时荧光定量聚合酶链反应(real time fluorescent quantitativepolymerase chain reaction，real-time PCR)检测三组RTEC中的维甲酸受体α(retinoic acid receptorα，RARα)、维甲酸受体β(retinoic acid receptorβ，RARβ)、维甲酸受体γ(retinoic acid receptorγ，RARγ)及转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)的mRNA表达，蛋白免疫印迹(western blotting，WB)检测三组RTEC中的RARα、RARβ、RARγ、TGF-β1、Ⅳ型胶原纤维（collagen-Ⅳ，Col-Ⅳ）及纤维连接蛋白(fibronectin，FN)的蛋白表达，荧光显微镜检测三组细胞超氧阴离子（superoxide anion，O2-）红色荧光密度和线粒体膜电位（mitochodria membrane potential，MMP）荧光密度的变化，酶动力学检测三组RTEC的细胞活力，超氧化物歧化酶(superoxide dismutase，SOD)和谷胱甘肽(glutathione，GSH)酶活力的变化，光学倒置显微镜观察三组RTEC的形态变化。　　结果:1.与control组比较，HR48组和HR72组RTEC中RARα和RARγ的mRNA及其蛋白表达均显著下降(均p＜0.05);与HR48组RTEC比较，HR72组RTEC中RARα和RARγ的mRNA及其蛋白表达均显著下降(均p＜0.05)，而三组细胞中RARβ的mRNA及其蛋白表达均无显著差异(均p＞0.05)。　　2.与control组比较，HR48组和HR72组RTEC中TGF-β1的mRNA及其蛋白表达以及Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均显著增多（均p＜0.05）;与HR48组RTEC比较，HR72组RTEC中TGF-β1的mRNA及其蛋白表达以及Col-Ⅳ和FN的蛋白表达均显著增多（均p＜0.05）。　　3.与control组比较，HR48组和HR72组RTEC中O2-红色荧光密度及MMP荧光密度均显著增加（均p＜0.05），SOD和GSH酶活力均显著降低（均p＜0.05）;与HR48组细胞比较，HR72组RTEC细胞中O2-红色荧光密度及MMP荧光密度均显著增加（均p＜0.05），SOD和GSH酶活力均显著降低（均p＜0.05）。　　4.与control组比较，HR48组和HR72组RTEC中细胞活力均明显减少（均p＜0.05），HR48组RTEC的铺路石样细胞形态消失，细胞密度减少，细胞碎片增多;与HR48组RTEC相比，HR72组RTEC中细胞活力减少更加显著(p＜0.05)，细胞形态变化更加明显，密度显著减少，细胞碎片明显增多。　　结论:在缺氧性损伤的RTEC中，RARα和RARγ的mRNA及其蛋白表达显著减少，并参与了RTEC的氧化损伤和纤维化发生，其作用机制可能与细胞产生O2-增多和细胞外基质(extracellular matrix，ECM)积聚有关。　　第二部分 RARs在缺氧性RTEC损伤中的作用及分子机制　　目的:通过过表达(OverExpression，OE)和敲除(KnockOut, KO)干扰体外培养的RTEC中RARs基因的表达，探讨RARs在缺氧性RTEC损伤中的作用及分子机制。　　方法:通过病毒转染技术，构建RARα过表达(RARα-OE，OEα)、RARβ过表达(RARβ-OE，OEβ)、RARγ过表达(RARγ-OE，OEγ)、RARα敲除(RARα-KO，KOα)、RARβ敲除(RARβ-KO，KOβ)、RARγ敲除(RARγ-KO，KOγ)病毒载体及阴性对照(negative，neg)病毒载体。设立9个实验组:control组、HR组、HR OEα组、HR OEβ组、HR OEγ组、HR KOα组、HR KOβ组、HR KOγ组及HR neg。control组RTEC不做任何处理，HR组RTEC只做缺氧处理，转染后缺氧处理的各组RTEC于基因干扰96小时后行缺氧处理。缺氧处理的具体步骤同第一部分。缺氧处理48小时后收集各组细胞行相关指标检测。应用real-time PCR检测各组RTEC中RARα、RARβ、RARγ及TGF-β1的mRNA表达，WB检测各组RTEC中RARα、RARβ、RARγ、TGF-β1、Col-Ⅳ及FN的蛋白表达，荧光显微镜检测各组RTEC中O2-红色荧光密度和MMP荧光密度的变化，酶动力学检测各组RTEC的细胞活力、SOD和GSH酶活力的变化，透射电子显微镜观察各组RTEC的形态变化。　　结果:1.与control组RTEC比较，HR组RTEC中RARα和RARγ的mRNA及其蛋白表达均显著下降（均p＜0.05）。与HR组RTEC比较，HR OEα组RTEC中RARα的mRNA及其蛋白表达，HR OEβ组RTEC中RARβ的mRNA及其蛋白表达和HR OEγ组RTEC中RARγ的mRNA及其蛋白表达均显著增多（均p＜0.05）;而HR KOα组RTEC中RARα的mRNA及其蛋白表达，HR KOβ组RTEC中RARβ的mRNA及其蛋白表达和HR KOγ组RTEC中RARγ的mRNA及其蛋白表达均显著减少（均p＜0.05）;HR neg组RTEC中RARα、RARβ和RARγ的mRNA及其蛋白表达均无显著差异（均p＞0.05）。　　2.与control组RTEC比较，HR组RTEC中TGF-β1的mRNA及其蛋白表达，Col-Ⅳ和FN蛋白表达均显著增多（均p＜0.05）。与HR组RTEC比较，HR OEα组和HR OEγ组RTEC中TGF-β1的mRNA及其蛋白表达，Col-Ⅳ和FN蛋白表达均显著减少（均p＜0.05）;HR KOα组和HR KOγ组RTEC中TGF-β1的mRNA及其蛋白表达，Col-Ⅳ和FN蛋白表达均显著增多（均p＜0.05）;而HR neg组、HR OEβ组和HR KOβ组RTEC中TGF-β1mRNA及其蛋白表达，Col-Ⅳ和FN蛋白表达均无显著差异（均p＞0.05）。　　3.与control组RTEC比较，HR组RTEC中O2-红色荧光密度及MMP荧光密度均显著增加（均p＜0.05），SOD和GSH酶活力均显著降低(均p＜0.05)。与HR组细胞比较，HR OEα组和HR OEγ组RTEC中O2-红色荧光密度及MMP荧光密度均显著减少（均p＜0.05），SOD和GSH酶活力均显著增加（均p＜0.05）;HRKOα组和HR KOγ组RTEC中O2-红色荧光密度及MMP荧光密度均显著增加（均p＜0.05），SOD和GSH酶活力均显著降低（均p＜0.05）;而HR neg组，HR OEβ组和HR KOβ组RTEC中O2-红色荧光密度和MMP荧光密度以及SOD和GSH酶活力均无显著差异(均p＞0.05);　　4.与control组RTEC比较，HR组RTEC中细胞活力明显降低(p＜0.05)，细胞肿胀，表面绒毛减少，核内出现异染色质凝集。与HR组细胞比较，HR OEα组和HR OEγ组RTEC中细胞活力均显著增大（均p＜0.05），细胞形态改善，表面绒毛增多，细胞肿胀减轻;HR KOα组和HR KOγ组RTEC中细胞活力均明显减少（均p＜0.05），细胞损伤更加明显，表面绒毛消失，甚至细胞肿胀破裂;而HR neg组，HR OEβ组和HR KOβ组RTEC中细胞活力均无显著变化（均p＞0.05），且细胞形态变化未见明显差异。　　结论:在缺氧性损伤的RTEC中，上调RARα或RARγ的表达具有减轻氧化损伤和纤维化的作用，下调RARα或RARγ的表达具有加重RTEC氧化损伤和纤维化的作用。其分子机制可能与RARα或RARγ减少O2-产生，增加SOD和GSH酶活力，减少TGF-β1产生，进而减少ECM积聚有关。