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目的：检测外周血及组织中微小核糖核酸155(miR-155)及微小核糖核酸196a(miR-196a)的表达,联合三种肿瘤标记物CA199、CA242及CEA对胰腺癌的诊断进行研究,探讨miRNA及血清肿瘤标记物在胰腺癌的诊断中的作用和意义。方法：收集60例经临床、影像、手术诊断的胰腺癌患者,20例慢性胰腺炎或胰腺癌前病变患者,10例正常健康捐献者的相关临床资料及外周静脉血；10例经外科手术或超声内镜下穿刺术(EUS-FNA)取得的胰腺病变组织。采用实时荧光定量聚合酶链(qRT-PCR)技术检测miR-155、miR-196a在上述病例中的表达。同时检测上述病例的三种肿瘤标记物CA199、CA242及CEA。结果：1.血浆miRNA的相对表达量血浆miR-155,miR-196a在胰腺癌患者血浆中的相对表达量显著高于慢性胰腺炎患者及正常对照组。miR-155的相对表达量：PCa组6.11±7.89,CP组168±2.95, Norm组0.4±1.6(bothP<0.01)；miR-196a相对表达量：PCa组8.52±9.44,CP组2.83±2.35,Norm组0.6±1.3,(bothP<0.01)。结果显示两种miRNA的表达量在胰腺癌组中均高于慢性胰腺炎组及正常人组中。2.建立Logistic回归模型探讨血浆miRNA水平与胰腺癌患者临床特征的关系在血浆miR-155、miR-196a水平与胰腺癌患者年龄、性别、肿瘤直径等临床特征的关系中,miR-155均与上述特征无关,但miR-196a与淋巴结转移有关。3.ROC曲线下面积根据诊断筛选试验原则绘制受试者工作特征曲线(ROC)计算血浆miR-155,miR-196a的ROC曲线下面积(AUC-ROC),AUC-ROC越大说明诊断效能越高。在胰腺癌+正常对照中,miR-155、miR-196a的ROC分别为0.601(95%CI：0.,588-0.648),0.632(95%CI：0.603-0.664),在胰腺癌+慢性胰腺炎miR-155,miR-196a的ROC分别为0.644(95%CI：0.621-0.675),0.671(95%CI：0.663-0.687)；在胰腺癌+慢性胰腺炎+正常对照的3组人群中miR-155,miR-196a的ROC分别为0.758(95%CI：0.711-0.802),0.772(95%CI：0.734-0.822)。由统计可看出miR-155,miR-196a的ROC曲线下面积在0.70-0.90之间,表明这两种miRNA对胰腺癌的诊断准确性为中等,具有一定的诊断价值。4.胰腺癌患者中血浆miR-155、miR-196a与血清肿瘤标记物CA199、CA242及CEA的敏感性及特异性比较胰腺癌患者血浆miR-155的敏感性及特异性分别是71.1%,63.3%；miR-196a的敏感性及特异性分别是73.4%,65.8%；两种miRNA的敏感性及特异性是77.4%和70.6%。三种血清肿瘤标记物CA199、CA242及CEA的敏感性及特异性分别是65.4%,60.7%。结果提示miRNA的敏感性及特异性比三种血清肿瘤标记物CA199、CA242及CEA的敏感性及特异性高。5.血浆与组织中miR-155、miR-196a的表达量比较组织中miR-155相对表达量7.32±8.01,miR-196a相对表达量8.94±10.67；血浆与组织中miR-155、miR-196a的表达量无显著性差异性。结论：qRT-PCR方法检测miRNA具有高度的敏感性和特异性,miR-155、miR-196a在胰腺癌中高表达,它们可能是胰腺癌早期诊断的特异性肿瘤标志物；且miR-196a与淋巴结转移相关,可能预示胰腺癌的进展。miRNA对胰腺癌的诊断效能优于三种血清肿瘤标记物CA199、CA242及CEA,对于胰腺癌高危患者可联合检测miRNA表达及CA199、CA242、CEA等血清标记物以提高对胰腺癌的诊断。EUS-FNA可成为获取胰腺病变组织的重要方法,并可行病理及miRNA的检测,成为区别胰腺良、恶性疾病的主要微创检查。血浆miRNA的检测可能替代组织miRNA的检测成为胰腺癌诊断的可行方法。