【摘 要】
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基因治疗恶性肿瘤是当前国内外研究的热点.其中以药和敏感基因治疗系统最为引人注目的,研究和应用较多的是单纯疱疹病毒I型(herpes simpiex virus type1,HSV-1)胸苷激酶(t
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基因治疗恶性肿瘤是当前国内外研究的热点.其中以药和敏感基因治疗系统最为引人注目的,研究和应用较多的是单纯疱疹病毒I型(herpes simpiex virus type1,HSV-1)胸苷激酶(thymidine kinase,TK)基因治疗系统,而且该系统具有独特的"旁路效应"(bystander effect),对于恶性肿瘤的治疗具有重要意义.该课题将含HSV-1 TK完整cDNA的逆转录病毒载体pLTRNL(真核表达载体)以脂质体法转染人肝癌细胞系HHCC.经抗生素G418选择,筛选出HSV-1 TK基因转染的HHCC,再经克隆化和亚克隆化后扩大培养,并命名为HHCC/TK.该课题同时研究了HSV-1 TK基因原核表达载体的构建和表达产物的免疫特性.该课题建立HSV-1 TK基因长期稳定转染的人细胞系,并证明其在体外对ACV具有敏感性和存在旁路效应,为应用HSV-1 TK基因对人类肝癌进行基因治疗提供了实验基础.原核表达具有免疫活性的HSV-1 TK融合蛋白,并能诱导出抗HSV-1 TK免疫血清,这将有利于观察TK基因在转染细胞中的表达情况和治疗效果,以及进一步完善该系统在研究治疗恶性肿瘤中的作用.
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