番茄抗细菌性斑点病的遗传特性和抗性基因的分离及鉴定

来源 :华中农业大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:repopw
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我们开展了番茄抗细菌性斑点病的研究.该研究的目标是:(1)确定番茄抗细菌性斑点病的遗传特性.(2)从中国番茄品种中获得抗番茄细菌性斑点病基因Pto的克隆.试验中采用番茄抗病品种和感病品种,通过常规规杂交及鉴定其子代的抗病性分离情况,确定在抗性品种红珍珠和美味樱桃中该抗病性呈显性单基因遗传.根据已报道Pto基因的同源序列设计引物,通过PCR扩增从10个抗病番茄品种中获得10个克隆.序列分析比较证明其中两个克隆(XX和BJX)和报道的Pto基因序列完全一致,表明我们已经从中国的番茄品种中获得了含有该基因的克隆.克隆XX序列编码区全长936核苷酸对,推导编码311个氨基酸,分子量为34kDa的蛋白.其余几个克隆与报道Pto基因序列的同源性在91﹪以上,因而为Pto基因同源序列.构建了Pto基因的原核表达载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)pLysS菌株,成功地实现了该基因的原核表达.结果产生出了表观分子量为31kDa的特异性蛋白.
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