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目的：证实反义RNA对RB1基因的转录在非小细胞肺癌存在调控作用，为进一步研究反义RNA在表观遗传学水平调控RB1基因的转录活性以及反义RNA和RB1基因在人体肿瘤的作用和意义提供实验依据。方法：1.在4株非小细胞肺癌细胞株H1299、SPC-A1、A549及H520中分别提取RNA，用实时荧光定量PCR的方法克隆RB1基因及其反义转录本ASRB1，对两者的相对转录水平进行分析。2.提取非小细胞肺癌细胞株SPC-A1的RNA，通过3’RACE检测及测序比对得到RB1的反义RNA-ASRB1的3’端序列。3.在细胞株H1299和H520中通过RNAi干扰反义RNA，检测RB1基因mRNA以及蛋白的表达，并与对照组（未进行RNA干扰组）进行比较分析。结果：1.在非小细胞肺癌细胞H1299、H520细胞株中，RB1表达量较高，而ASRB1呈现较低表达；在A549、SPC-A1细胞株中，RB1表达量较低，而ASRB1呈现较高表达。RB1和ASRB1的转录水平负相关（r2=0.891，P<0.01）。2.ASRB13’RACE结果见正文，最终得到ASRB13’端序列。3.通过RNAi干扰反义RNA后，H1299和H520细胞株中RB1基因mRNA以及RB1蛋白表达量均高于对照组（未进行RNA干扰组）。结论：1.不同的非小细胞肺癌细胞株中RB1及其反义RNA-ASRB1表达量有差异，同时，在非小细胞肺癌细胞株H1299、H520、SPC-A1和A549中，普遍存在RB1基因转录水平和ASRB1表达水平负相关关系。2.为了设计针对ASRB1已知片段的siRNA来进行RNA干扰，我们成功的获得了RB1反义RNA-ASRB1的3’端序列。3.反义RNA-ASRB1在非小细胞肺癌细胞中对RB1基因的转录存在负调控作用。