海洋放线菌SMA-1代谢物多样性研究及其活性物质分离纯化

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海洋微生物作为挖掘新天然产物的重要来源,是当下一个热门的研究领域。本文以一株分离自黄海海泥(山东日照附近)的海洋放线菌SMA-1为研究对象,利用单菌多次级代谢物(One Strain Many Compounds,OSMAC)方法,增加其代谢物多样性,并通过化学和生物活性追踪对代谢物进行了初步分离。根据单菌多次级代谢物方法,以53种含不同碳源和氮源的培养基对这株菌进行发酵培养,增加其代谢物多样性;利用生物活性检测确定53种发酵液的代谢物抗菌谱,从不同抗菌谱挑选活性较高的发酵液进行薄层层析(TLC)分离,在多种展开剂和显色剂作用下,TLC快速表征了这株放线菌代谢物谱的多样性;结合生物活性检测,从TLC指纹图谱里定位了2个有差异的活性斑点。从其中一个差异性活性斑点出发,以生物活性和TLC为导向对斑点的化合物进行分离纯化;另外,根据三重四级杆质谱分析,发现40号发酵液含有与斑点化合物分子量相同的物质,故对40号发酵液也进行分离纯化。利用有机溶剂萃取、硅胶柱层析、固相萃取、大孔吸附树脂、半制备型HPLC等分离纯化手段,以及LC-MS、NMR等现代波谱技术,最终获得三个互为同分异构体的二酮哌嗪二聚体化合物iso-Naseseazine B、 Naseseazine B、aspergilazine A。
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