茭白细胞分裂素双元信号系统基因的鉴定及其在茭白膨大过程中的表达研究

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细胞分裂素(Cytokinin,CTK)是一类植物激素,主要分布于植物的幼嫩部位如茎尖,其主要通过促进植物根和芽中的细胞分裂或胞质分裂,参与细胞生长和分化从而影响植物的生长发育过程。前人的研究表明,CTK对茭白肉质茎膨大具有重大作用,而植物体内的CTK是通过一套类似于细菌的双元信号系统(Two-component System,TCS),通过“磷酸接力”将信号传递至下游元件的,其对植物的生长和发育如细胞形态发生、信号转导和环境胁迫的响应方面等起非常重要的作用。茭白作为中国的特色水生蔬菜,近年来产业发展迅猛,但与它相关的基础研究却严重滞后,特别是对茭白的孕茭机理,我们仍然知之甚少。而随着许多物种的全基因组测序的完成,越来越多的物种如拟南芥、水稻、等植物有关CTK的TCS信号转导机制逐渐被报道,但在茭白中还没有。本研究以“浙茭2号”作为供试材料,采用细胞生物学,生物信息学和分子生物学的手段来阐述CTK的TCS调控“浙茭2号”膨大的研究。结果显示,促使茭白膨大的主要因素是由细胞生长引起的,外源喷施细胞分裂素(trans-Zeatin)可以激发茭白的膨大,提高茭白的膨大率。而茭白在膨大前期以细胞分裂为主,说明CTK促进茭白的膨大可能是通过诱导细胞分裂来实现的;通过对茭白全基因组进行生物信息学分析,我们共筛选鉴定出和TCS所有成分同源的56种蛋白,包括13种Zl HKs,8种Zl HPs和35种Zl RRs(其中有17种A型Zl RRs,12种B型Zl RRs,2种C型Zl RRs以及4种Zl PRRs)。通过系统进化树分析,发现茭白和水稻的CTK的TCS信号途径的基因在进化上要比拟南芥更近一些。通过对不同发育阶段(未膨大、开始膨大和露白)的茭白肉质茎进行转录组测序,并结合前人的RNA-seq数据综合分析,结果表明,56个TCS基因中有51个基因参与茭白膨大前后的表达,且部分CTK信号基因的表达发生了显著的变化,即Zl RR7、Zl RR8、Zl RR10、Zl HP5、Zl RR30以及Zl PRR2六个基因可能参与茭白的膨大过程;对Zl HP5进行RNA原位杂交分析,Zl HP5基因在茭白茎尖维管组织中特异性表达。
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