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伏安酶联免疫分析具备伏安法的高灵敏度及准确性,又以免疫反应弥补其在特异性上的不足,具有宽检测范围及低检测限,适合少量样品分析,仪器简单,操作方便。本工作将辣根过氧化物酶(HRP)催化过氧化氢(H2O2)氧化3,4-二氨基苯甲酸的酶促反应与其氧化产物的电极还原相偶合,建立了3,4-二氨基苯甲酸-H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫新体系。确定的最佳反应条件下,测定游离HRP检出限为6.0×1013g/mL,线性范围为4.0×10-9~4.0×1012g/mL。 利用此体系成功应用于甲胎蛋白酶联免疫试剂盒,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为0.20~50ng/mL。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并于现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。 利用此体系首次成功应用于癌胚抗原酶联免疫试剂盒,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为0.50~80ng/mL。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并于现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。 利用此体系首次成功应用于人血清铁蛋白酶联免疫试剂盒,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为0.10~80ng/mL。用所建立的方法对人血清品进行了测定,并于现行的ELISA法进行对照,二者相关性:很好。 利用此体系首次成功应用于前列腺特异性抗原酶联免疫试剂盒,灵敏度高于经典ELISA法。测定线性范围为0.20~16ng/mL。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并于现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。 利用此体系首次成功应用于猪口蹄疫3A蛋白间接检测ELASA试剂盒。灵敏度高于经典ELISA法。用所建立的方法对人血清样品进行了测定,并于现行的ELISA法进行对照,二者相关性很好。 同时对所建立体系进行了机理探讨,经过表证,确立了此体系的生成物结构。