益肾健脑方对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马BDNF/TrkB表达的影响

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目的:探讨益肾健脑方对血管性痴呆大鼠学习记忆能力及海马BDNF/Trk B表达的影响。方法:选取SPF级雄性SD大鼠65只,按照随机数字表法,随机抽取6只作为假手术组,余59只均采用改良永久性双侧颈总动脉结扎法建立血管性痴呆模型。造模4周后,Morris水迷宫筛选痴呆模型大鼠21只,将其随机分为模型组、中药组、阳性对照组,每组7只。中药组予灌服益肾健脑方汤药(12.15g/kg.d),阳性对照组灌服多奈哌齐混悬液(0.45mg/kg.d),模型组、假手术组灌以等体积蒸馏水,每周称重一次,调整给药剂量,连续给药1月。最后一次灌胃24小时后Morris水迷宫试验评估大鼠空间学习和记忆能力,随后处死大鼠、海马组织取材、HE染色观察海马CA1区组织形态学变化、蛋白印迹法(Western Blot)检测海马BDNF/Trk B的表达。实验数据统计结果以均数±标准差(`x±S)表示。符合正态分布采用单因素ANOVA分析,方差齐采用LSD法进行两两比较,方差不齐采用Tamhane’s法。p<0.05判定为差异具有统计学意义。结果:1.行为学检测:随着训练时间延长,各组大鼠平均逃避潜伏期都有不同程度的缩短。训练的第1、2天,各组大鼠平均平均逃避潜伏期无明显差异(p>0.05),训练第3天开始,与假手术组比较,模型组大鼠的平均平均逃避潜伏期明显延长(p<0.01),与模型组相比,中药组及阳性对照组大鼠平均逃避潜伏期虽有缩短趋势,但差异无统计学意义(p>0.05);至第4、5天,与模型大鼠比较,各组大鼠平均平均逃避潜伏期均明显缩短(p<0.01);在训练全过程,中药组大鼠平均平均逃避潜伏期与阳性对照组接近,差异无统计学意义(p>0.05)。2.HE染色:假手术组大鼠海马CA1区神经元数量丰富、形态规则,排列紧密,染色均一。模型组大鼠海马CA1区神经元数目明显少于假手术组,且细胞排列紊乱、疏松,可见细胞空泡化、核分裂及核固缩现象。中药组及阳性对照组大鼠海马CA1区神经元仍有轻微排列紊乱,偶见细胞空泡及核固缩,但在神经元数量及结构上均较模型组有所改善。3.BDNF/Trk B的表达:与假手术组比较,模型组大鼠海马组织BDNF/Trk B蛋白的表达显著减少(p<0.01)。与模型组相比,中药组及阳性对照药组大鼠海马组织BDNF/Trk B蛋白的表达水平明显提高(p<0.01)。结论:益肾健脑方可改善血管性痴呆模型大鼠的学习记忆能力,其机制可能为上调海马BDNF/Trk B的表达,促进神经元损伤后修复。
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