芯片微通道改性剂的合成及改性芯片在DNA分析中的应用

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生命科学是本世纪前沿科学领域之一,生命科学的发展离不开研究手段,特别是分离、分析、测试方法的创新。DNA的电泳分析是生命科学研究领域中的重要组成部分,它对基因测序、DNA指纹识别以及病原体的鉴定等都具有重大的意义。芯片毛细管电泳在分析速度和分离效率上比传统毛细管电泳都有了数量级的提高,且样品和试剂的消耗量仅仅只有pL级,因此为生物样品的分析提供了一种新的方法。  表面改性是提高芯片毛细管电泳分离生物大分子性能的关键技术。而硅烷化反应是玻璃微流控芯片表面改性的关键步骤。本文的目的是合成一种性能好的硅烷化试剂、建立玻璃芯片上长寿命耐侵蚀的永久性涂层的制作方法、用芯片毛细管电泳分离DNA片段。  本文第一章综述了烯丙基硅烷化试剂的合成方法、微流控玻璃芯片的制作、芯片表面的改性以及芯片毛细管电泳分析DNA片段的现状和发展。  第二章探索了一种新的合成烯丙基硅烷的方法。采用稀土金属钐代替金属镁,形成的烯丙基溴化钐是一种能很好的把烯丙基引入到许多底物中去的试剂,它可以与氯硅烷反应生成稀土金属钐。该反应条件温和、产率高,且可以通过控制反应物的比例生成纯度很高的烯丙基氯硅烷,避免了交叉卤代反应的发生。  第三章采用第二章合成的烯丙基氯硅烷作为玻璃微流控芯片永久改性的硅烷化试剂,并与丙烯酰胺共聚,在玻璃微流控芯片上形成了一层稳定、性能良好的永久涂层。通过改性,有效的抑制了电渗流,消除了通道壁对DNA分子的吸附。在此基础上,进一步研究了筛分介质浓度、分离距离对DNA分离效率的影响。
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