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硒(Selenium)具有调节机体代谢、提高机体免疫力和抗病力、影响动物繁育机能和抗氧化等一系列重要的生物学功能,壳聚糖(Chitosan)是具有增强免疫、抗氧化、抗癌和抗风湿等作用。羧甲基壳聚糖硒是硒与壳聚糖的有机化合物,能同时发挥有机硒和壳聚糖的双重功能。本试验将羧甲基壳聚糖与亚硒酸钠合成羧甲基壳聚糖硒,研究其对机体抗氧化功能的作用,为其广泛应用提供科学依据。主要研究结果如下:1.为了优化羧甲基壳聚糖硒的合成条件,本试验分别对不同添加剂量的羧甲基壳聚糖,亚硒酸钠,冰乙酸和反应时间进行单因素预试验,选出其中三个因素进行正交试验,得出最佳反应条件。单因素预试验结果为羧甲基壳聚糖,亚硒酸钠和冰乙酸三个因素在硒的有效转化率以及硒含量方面均表现优异。正交试验的结果表示最佳合成条件为:1.25g羧甲基壳聚糖溶于50 mL去离子水中,然后加入0.1 m L 1%冰乙酸,亚硒酸钠1.67g溶于10 mL的水中后加入羧甲基壳聚糖溶液中,反应2 h,缓慢加入180m L的无水乙醇,常温反应,次日抽滤并用无水乙醇洗涤3次,冷冻干燥得羧甲基壳聚糖硒。合成的羧甲基壳聚糖硒为无定形的白色粉末,无臭,硒含量为109.3943mg/g,产率为39.49%。通过红外光谱和紫外光谱分析,证实了羧甲基壳聚糖硒的成功合成。2.本试验旨在研究羧甲基壳聚糖硒对小鼠抗氧化功能以及免疫功能的影响。将180只昆明小鼠随机分为三组,每组60只,雌雄各半。I组小鼠饲喂基础日粮中添加羧甲基壳聚糖硒的日粮(其含量以硒计为0.2 mg/kg),II组小鼠饲喂添加亚硒酸钠的日粮(其硒含量以计为0.2 mg/kg),III组小鼠饲喂基础日粮。28天测定血液硒含量,GSH-Px和SOD活性以及MDA含量。在试验第15天时进行脾脏淋巴细胞转化试验,测定血浆IL-2和IFN-γ浓度、PFC、HC50、DTH。试验结果表明:I组小鼠血液硒含量,GSH-Px活性,PFC,IL-2和IFN-γ浓度均高于II组(P<0.01或P<0.05)。I组小鼠血浆SOD活性,血清溶血素水平,Con-A诱导脾脏淋巴细胞转化试验和DTH均高于I组(P<0.01或P<0.05)。I组小鼠血浆SOD、血清溶血素水平、DTH和IFN-γ浓度也高于II组,但差异不显著(P>0.05)。I组小鼠血浆MDA含量低于II组和III组(P<0.01或P<0.05)。本试验结果说明:羧甲基壳聚糖硒在提高血液硒含量,抗氧化能力,细胞免疫和体液免疫方面均比亚硒酸钠更好。3.本试验旨在研究羧甲基壳聚糖硒对兔全血硒含量以及血清抗氧化功能的影响。将36只平均体重在2kg左右的兔随机分成3组,每组12只,雌雄各半,I、II组分别饲喂在基础日粮中添加羧甲基壳聚糖硒和添加亚硒酸钠(其含量以硒计均为0.30 mg/kg)的日粮,III组为对照组,饲喂基础日粮(其含量以硒计为0.10 mg/kg),试验期30 d。10 d,20 d和30 d时空腹采血,30 d后观察羧甲基壳聚糖硒对兔全血硒含量和血清抗氧化能力的影响。试验结果表明,在饲料中添加硒含量相同的羧甲基壳聚糖硒和亚硒酸钠时,与亚硒酸钠组相比羧甲基壳聚糖硒组可以提高兔全血硒含量及其血清的GSH-Px、CAT活性和T-AOC,降低MDA活性;在20 d时,I组血清GSH-Px和T-AOC均显著高于II组和III组(P<0.05);在30d时,I组全血硒含量和血清T-AOC与对照组相比均有显著差异(P<0.05),I组过CAT活性与II组和III组相比有显著差异(P<0.05)。结果提示,添加羧甲基壳聚糖硒能提高兔全血硒含量和血清抗氧化能力。4.本试验旨在探究饲料添加羧甲基壳聚糖硒能对兔生产性能,组织硒含量和组织抗氧化能力的影响。将36只兔随机分成三组,I、II组分别饲喂在基础日粮中添加羧甲基壳聚糖硒和添加亚硒酸钠(其含量以硒计均为0.30mg/kg)的日粮,III组为对照组,饲喂基础日粮(其含量以硒计为0.1mg/kg),每组12只,雌雄各半,试验期30d。试验开始与结束时称取兔体重。试验结束时,取兔肝脏、肾脏、肌肉、脾脏和心肌组织,观察羧甲基壳聚糖硒对兔生产性能、组织硒含量和组织抗氧化能力的影响。试验结果表明,与对照组相比,兔饲料添加硒源能显著提高兔日增重(P<0.05),降低料重比;其中,添加羧甲基壳聚糖硒组的日增重高于亚硒酸钠组,前者的肉料比低于后者;添加羧甲基壳聚糖硒可以提高兔肝脏、肾脏、肌肉、脾脏和心肌组织硒含量;添加羧甲基壳聚糖硒可以提高兔肝脏、肾脏和肌肉的GSH-Px、CAT、T-SOD活性和T-AOC,降低MDA活性。结果说明,添加羧甲基壳聚糖硒能提高兔生产性能,组织硒含量和组织抗氧化能力。