皮南牛肌肉生长抑制素基因多态性及其与生产性状相关性研究

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本研究选用了皮埃蒙特牛、南阳牛、皮埃蒙特和南阳牛杂种(皮南牛)和荷斯坦牛作为实验动物。摸索了毛囊基因组DNA提取方法、筛选了MSTN基因的SNP并应用选择性PCR扩增方法检测分析了1008头皮南牛群体中MSTN基因的分子遗传多态性及其与体重(初生重、6月龄重、12月龄重、18月龄重、24月龄重、36月龄重),12月龄体尺(体高、体斜长、坐骨宽、胸围、管围)性状之间的相关性,旨在探索将该基因作为遗传标记应用于肉牛育种的可行性并为遗传标记辅助选择提供理论依据。取得的结果如下:1.确立了Proteinase-K裂解法是一种提取毛囊基因组DNA的最佳方法,它具有高效、普遍、省时、安全等优点。2.建立了快速、准确和有效的分析牛MSTN基因多态性的选择性PCR方法。3.皮埃蒙特牛、皮南牛、南阳牛、荷斯坦牛MSTN基因的三个外显子上SNP的存在情况不一致,其中,南阳牛在第一外显子的295位上存在A→G的突变、南阳牛和荷斯坦牛第二外显子的414位上存在C→T的突变、皮埃蒙特牛和皮南牛第三外显子的938位上存在G→A突变,该突变是错义突变,其导致第三外显子上313位氨基酸残基由半胱氨酸(Cys)→酪氨酸(Tyr)。4.在皮埃蒙特牛MSTN基因第三外显子上发现了AA、AB和BB三种基因型,其基因型频率分别为0.3、0.6和0.1,等位基因A和B的频率为0.6和0.4。卡方检验结果表明这个位点处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05)。5.在皮南牛MSTN基因第三外显子上也发现了AA、AB和BB三种基因型,其基因型频率为0.069、0.726和0.205,等位基因A和B的频率为0.432和0.568。卡方检验结果表明这个位点处于Hardy-Weinberg不平衡状态(P<0.01)。6.皮南牛MSTN基因第三外显子多态性与体尺性状关联分析结果表明:除管围外,该基因与体尺性状关联达到了极显著水平(P<0.01),AA基因型个体的体高、体斜长、胸围、坐骨宽显著高于AB和BB基因型个体(P<0.05),而AB和BB基因型个体在这四个体尺性状上则未达到显著水平(P>0.05),三个基因型在管围性状上差异不显著。公母牛体尺性状分别分析发现,不论公牛还是母牛分析结果与未分之前一致,AB和BB基因型在体尺性状上差异不显著(P>0.05)。7.皮南牛MSTN基因第三外显子多态性与各月龄体重关联分析结果表明:该基因与体重性状关联达到了极显著水平(P<0.01),AA基因型个体体重显著高于AB和BB基因型个体(P<0.05),AB基因型个体在6、12、1 8、24和36月龄重性状上显著高于BB基因型个体(P<0.05),在初生重上未达到显著水平(P=0.6815)。将公母牛体重性状分别分析发现,该基因与体重性状关联除公牛初生重为显著外,其余达到了极显著水平(P<0.01),AA基因型个体在体重性状上显著高于AB和BB基因型个体(P<0.05),并且公牛的体重高于母牛。母牛AB和BB基因型个体在6、12、18、24和36月龄重性状上达到了显著水平(P<0.05),两个基因型在初生重上未达到显著水平(P=1.0000)。公牛AB和BB基因型个体在18、24和36月龄体重性状上表现出显著差异(P<0.05),在初生重、6和12月龄体重性状上未达到显著水平。研究结果显示:MSTN基因exon3的多态性与体重性状和体尺性状显著相关,是一个潜在的分子遗传标记,可望作为肉牛标记辅助选择的候选基因。
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