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本实验通过观察CMC平板上形成纤维素水解圈的方法从芦笋老茎堆肥样品中共分离获得了8株细菌和6株放线菌,均能在以CMCNa为唯一碳源的筛选平板上生长,且经过刚果红染色后,能够于菌落四周形成清晰的透明圈。选择其中D/d值较大的6株菌接入液体产酶培养基内摇瓶发酵并测定粗酶液的纤维素水解活性。结果显示,细菌B-5和放线菌S-3具有最高的产酶活性,细菌B-5的CMC酶活力、FPA酶活力分别为24.15U/mL、13.98U/mL,放线菌S-3的CMC酶活力、FPA酶活力分别为21.86U/mL、12.32U/mL。观察菌株B-5的菌落特征并结合一系列生理生化试验,发现该菌株的生理特性同《伯杰氏细菌鉴定手册》第八版中枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)的描述最相符合,据此,将其鉴定为枯草芽孢杆菌。根据形态特征和16S rDNA序列分析结果,菌株S-3应为链霉菌(Streptomyces sp.)。考察了菌株B-5、S-3对不同碳源、氮源的利用状况,结果表明CMCNa和麸皮等纤维素类物质对菌株产酶有着很好的诱导作用,当以蔗糖和葡萄糖为碳源时,菌株产酶活性不明显。枯草芽孢杆菌B-5的最佳碳源为CMCNa,其次为麸皮。链霉菌S-3在以天然纤维素材料如麸皮、芦笋老茎秸秆粉为碳源时,产酶活性最高,其中以麸皮为碳源时CMC酶活力和滤纸酶活力均达到最大值。蛋白胨和硫酸铵等氮源物质的添加有利于菌株产生纤维素酶。枯草芽孢杆菌B-5对有机氮源的利用效果较好,以蛋白脲为唯一氮源时,发酵液具有最高的纤维素水解活性,其次为酵母膏。硫酸铵、硝酸铵等无机氮源更易被链霉菌S-3利用,尿索由于需要进一步被降解,发酵效果不好,其中最佳氮源为硫酸铵。研究了培养基初始pH值和培养温度对菌株B-5、S-3产生纤维素酶的影响。枯草芽孢杆菌B-5在培养基初始pH值为7.5、培养温度为40℃时具有最高的产酶活性。链霉菌S-3的最适发酵条件为培养基初始pH值6.5、发酵温度50℃～55℃。采用以上条件进行发酵培养,枯草芽孢杆菌B-5大量繁殖并迅速发酵产酶,在48h时,CMC酶活力和滤纸酶活力均达到最大值,分别为：27.7U/mL、23.6U/mL,此后该值随着发酵时间的持续延张而略有降低。链霉菌S-3产酶活性增张较缓慢,为一周左右,培养第8天时发酵液中的CMC酶活力和滤纸酶活力均达到顶峰,分别为：24.8U/mL、18.2U/mL。