【摘 要】
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目的:观察复方左归丸对初老大鼠生殖器官血管生成与PLGF、HGF及其受体的关系,探讨左归丸改善生殖功能低下的主要作用机理。方法:实验选用10-12月龄的40只雌性初老大鼠,随机分为模型组、结合雌激素组、左归丸低剂量组、左归丸高剂量组,每组各10只;另取10只4月龄SD大鼠作为正常对照组。模型组和正常对照组以蒸馏水20g/kg灌胃,结合雌激素组用65ug/kg结合雌激素进行灌胃,左归丸低剂量组、左归
【基金项目】
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重庆市科委基础科学与前沿技术研究（NO.cstc2017jcyjAX0350）
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目的:观察复方左归丸对初老大鼠生殖器官血管生成与PLGF、HGF及其受体的关系,探讨左归丸改善生殖功能低下的主要作用机理。方法:实验选用10-12月龄的40只雌性初老大鼠,随机分为模型组、结合雌激素组、左归丸低剂量组、左归丸高剂量组,每组各10只;另取10只4月龄SD大鼠作为正常对照组。模型组和正常对照组以蒸馏水20g/kg灌胃,结合雌激素组用65ug/kg结合雌激素进行灌胃,左归丸低剂量组、左归丸高剂量组分别灌胃左归丸11g/kg、33g/kg浸膏,一日一次,连续灌胃20日后,用苏木精-伊红染色（Hematoxylin-eosin staining,HE）,观察大鼠卵巢、子宫、阴道的组织形态学,计算大鼠的生殖器官脏器指数,免疫组化法（Immuno histo chemistry）及免疫印迹法（Western blot）检测PLGF、HGF及其受体蛋白表达情况;原位杂交技术（In situ hybridization,ISH）检测PLGF、Flt-1、HGF、c-Met m RNA表达情况;酶联免疫吸附实验（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测E2、P、FSH含量水平。结果:与正常对照组比较,模型组中各级生长卵泡数、黄体数、血管数明显减少,与模型组比较,左归丸高低剂量组、结合雌激素组的生长卵泡数、黄体数、血管数增多,闭锁卵泡数明显减少（P＜0.05）,与结合雌激素组比较,左归丸各剂量组差异无统计学意义（P＞0.05）,与左归丸低剂量组比较,左归丸高剂量组的大鼠卵巢各级卵泡数、黄体数、血管数增加,减少闭锁卵泡数（P＜0.05）;与模型组比较,左归丸各剂量组和结合雌激素组可明显增加初老大鼠阴道黏膜厚度、阴道黏膜皱襞数和固有层血管数（P＜0.05）,左归丸高剂量组和结合雌激素组可明显增加子宫内膜厚度、肌层厚度和腺体直径（P＜0.05或P＜0.01）,与结合雌激素组比较,左归丸各剂量组差异无统计学意义（P＞0.05）,与左归丸低剂量组比较,左归丸高剂量组可增加初老大鼠阴道黏膜厚度、阴道黏膜皱襞数和固有层血管数（P＜0.05）;与模型组比较,左归丸高低剂量组和结合雌激素组可上调大鼠血清E2、P水平,下调血清FSH水平（P＜0.05或P＜0.01）,与结合雌激素组比较,左归丸高剂量组E2、P水平含量升高（P＜0.05）,与左归丸低剂量组比较,左归丸高剂量组E2、P升高（P＜0.05）,FSH水平降低（P＜0.05）;与正常对照组比较,模型组中大鼠生殖器器官组织中PLGF、HGF及其受体蛋白及m RNA呈较低反应（P＜0.01）,与模型组比较,左归丸低、高组及结合雌激素组PLGF、HGF及其受体蛋白及m RNA表达量增大,阳性反应面积增大,光密度增高（P＜0.01）,与结合雌激素组比较,左归丸高低剂量组差异均无统计学意义（P＞0.05）;与低剂量组作对比,左归丸高剂量组大鼠生殖器官组织中PLGF、HGF及其受体蛋白及m RNA的表达水平均有所上升。结论:左归丸可能通过提高大鼠生殖器官中PLGF、HGF及其受体蛋白和m RNA水平,从而对初老大鼠生殖器官血管生成有促进作用,进而改善大鼠生殖器官功能。
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