毛细管电泳分析茶黄素类和茶多酚的方法与应用研究

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茶多酚及其氧化产物茶黄素类是茶叶中重要的生化品质成分,也是对人体健康最为有益的物质。为了建立茶多酚和茶黄素类的高效、快速、简便的分析方法,本文对毛细管电泳仪分析茶黄素类和茶多酚的分离检测条件进行了系统优化和方法评估,并将建立的方法应用于茶叶品质检测、茶黄素类体外酶促氧化过程监控和茶叶深加工产品(茶多酚、茶黄素类等)质量的检验。研究结果如下:1.建立了毛细管电泳分析茶黄素类的方法。在250mmol/L H3BO4、10 mmol/L KH2PO4、0.75 mmol/L SDS和20%(v/v)乙腈组成的pH值为7.5的电泳介质中,选择25kV电压、20℃柱温和200nm波长检测,可在10min以内将标样中的四种主要茶黄素类单体分离,并获得较高的检测灵敏度。四种茶黄素类单体浓度与峰面积值之间的相关系数r=0.9945~0.9990,检测限在0.64~0.53μg/ml之间,加标回收率为92.50~108.36%,变异系数≤2.67%。应用该方法分析了红茶样品和茶黄素类产品中TFs的含量,红茶茶汤样品需用乙酸乙酯萃取处理才可达到较好的分离效果和基线水平,而茶黄素类产品则可不经萃取处理,直接溶解进行分析,证明该方法可快速、准确分析茶黄素类产品中茶黄素类的含量。2.建立了毛细管电泳同时分析六种儿茶素类的方法。用含有200 mmol/L H3BO4(pH7.7)、10 mmol/L KH2PO4、9 mmol/Lβ-CD和27.5%乙腈(v/v)的电泳介质,在电压25kV、柱温30℃下分离和波长200nm处检测,可在7.5min以内将EGCG、ECG、EC、EGC、GC和C六种儿茶素组分全部分离,有效提高了EGC/EC/C、EGCG/ECG之间的分离度,各组分标样浓度与峰面积值之间呈良好的线性关系,相关系数r=0.9985~0.9998 ,检测限为0.39~0.78μg/ml ,各组分的加标回收率在96.60~113.83%之间,方法变异系数小于3.54%。3.确立了毛细管电泳同时分析四种茶黄素类和六种儿茶素类的方法。应用2中所述的缓冲体系和电泳条件,不仅可将六种儿茶素类化合物分离,且可同时分离四种茶黄素类物质,使这十种物质在8min内全部基线
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