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阿尔茨海默症（Alzheimer’s disease,AD）,一种常发生在老年人群中的神经退行性疾病。主要表现为认知功能下降,记忆力减退等。AD严重影响患者的身心健康,对个人、家庭及社会造成巨大的经济负担。因此,AD的预防与治疗成为社会迫切渴望解决的难题之一。当药黄素（Swertisin）是酸枣仁的主要活性成分之一,具有抗炎、抗氧化、增强学习记忆等广泛的药理学作用。已有研究表明:在中枢神经系统中,当药黄素可以抑制促炎因子的释放与氧化酶的活性,对神经退行性疾病损伤起到保护作用;动物行为学实验中,当药黄素可以改善小鼠学习记忆障碍,增强小鼠学习记忆任务等。这些研究表明当药黄素的保护作用可能与抗炎和抗氧化有关,但其机制尚不清楚。因此,本文基于Aβ25-35级联与神经炎症学说,结合内源性大麻素2-AG抗炎的神经保护作用,采用Aβ25-35诱导的AD损伤模型为研究对象,结合液质联用技术、蛋白免疫印迹法、膜片钳技术等现代生化技术方法来探讨当药黄素的神经保护作用及作用机制。具体研究如下:1.当药黄素对Aβ25-35诱导的海马脑片AD模型的保护机制研究急性分离小鼠海马并孵育给药,Aβ25-35聚集体作用于海马脑片建立AD损伤模型。结果表明:1)当药黄素上调了内源性2-AG的含量,主要通过抑制2-AG的代谢实现的。抑制Aβ25-35诱导的2-AG特异性降解酶MAGL蛋白的过表达;降低Aβ25-35诱导的COX-2蛋白过表达且抑制COX-2的酶活,IC50值为55.4 nM;2)当药黄素对Aβ25-35诱导的神经炎症因子（IL-6、IL-1β）与凋亡（Bax和Bcl-2）有显著地改善作用。但用SR1（CB1R的阻断剂）预孵育脑片时,改善作用消失,说明当药黄素是通过CB1R改善Aβ25-35诱导的神经炎症与凋亡;3)外源性2-AG也抑制Aβ25-35诱导的炎症因子TNF-α的过表达,与内源性2-AG的结果一致;4)动态光散射法研究表明当药黄素使Aβ25-35聚集体发生解聚;5)膜片钳技术记录海马CA1区的场兴奋性突触后电位,以LTP为指标,发现当药黄素改善了Aβ25-35诱导的学习记忆障碍;6)当药黄素对Aβ25-35诱导的NF-κB蛋白表达没有影响,而抑制了Aβ25-35诱导的p-NF-κB蛋白的过表达;阻断CB1R,作用消失;表明当药黄素发挥神经保护作用是通过CB1R依赖的NF-κB信号通路实现的。2.当药黄素对Aβ25-35诱导的原代海马神经元AD模型的保护机制研究Aβ25-35诱导原代海马神经元构建AD模型,采用CCK-8法、蛋白免疫印迹法与Elisa试剂盒法进一步评估当药黄素对Aβ25-35诱导的原代海马神经元AD模型的保护作用。结果表明:当药黄素显著降低了Aβ25-35诱导的细胞死亡,提高细胞的存活率;在原代海马神经元同样抑制2-AG的代谢来发挥抗炎、抗凋亡的神经保护作用,且这种神经保护作用是通过CB1R依赖NF-κB信号通路来实现的。3.当药黄素对Aβ25-35诱导的BV-2小胶质细胞AD模型的影响Aβ25-35诱导的BV-2小胶质细胞建立AD模型,采用MTT法、流式细胞术进一步探究当药黄素对Aβ25-35诱导BV-2细胞的保护作用。结果表明当药黄素对Aβ25-35诱导的BV-2细胞的损伤无改善作用且当药黄素对Aβ25-35诱导的BV-2小胶质细胞的凋亡也无改善作用。综上研究表明,当药黄素对Aβ25-35诱导的小鼠海马脑片与原代海马神经元AD损伤模型有一定的保护作用,其作用机制是当药黄素通过上调2-AG信号来发挥神经保护,从而抗AD。