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研究目的:观察骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells, BMSCs)移植对经CCL4诱导的急性肝衰竭大鼠的疗效。实验方法:1.BMSCs的分离、培养及鉴定无菌条件下分离大鼠股骨骨髓,采用全骨髓贴壁筛选法培养并纯化其BMSCs,经免疫细胞化学法及流式细胞仪法检测其是否表达免疫表型CD29、CD44及CD34、CD45。2.BMSCs移植疗效观察30只健康SD大鼠随机均分为3组:正常对照组、肝衰竭组和移植组。正常对照组不予任何处理,肝衰竭组和移植组均给予一次性腹腔注射50%四氯化碳石蜡油溶液(12 mL/kg)以建立急性肝衰竭模型,然后分别经鼠尾静脉注射生理盐水和等量骨髓间充质干细胞。最后观察三组大鼠存活率、肝功能及肝脏组织病理变化情况。结果:1.免疫细胞化学染色法检测显示,P3代BMSCs CD29, CD44表达阳性,CD34. CD45表达阴性,阳性细胞表现为细胞膜呈棕色或棕褐色;流式细胞仪检测结果显示P3代BMSCs CD29、CD44高表达,阳性率分别为99.3%,99.6%;CD34、CD45低表达,阳性率分别为4.3%,17.1%。2.大鼠存活率结果显示,CCL,所致肝衰竭鼠1周存活率为20%,BMSCs移植组生存率为70%,肝功能指标中ALT和AST相比,移植组明显低于肝衰竭组;肝脏组织病理学结果显示移植组肝细胞变性、坏死程度以及炎症细胞浸润程度明显轻于肝衰竭组。结论:1.利用全骨髓贴壁筛选法培养可获得纯度高、细胞形态均一BMSCs。2. BMSCs移植能显著改善急性肝衰竭大鼠肝功能、减轻肝脏坏死程度及提高其生存率。