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本文建立了少突胶质细胞定向诱导的方法。我们在先前建立的分离和培养大鼠胚胎神经干细胞技术的基础上,借鉴他人报道的方法并加以改进,建立了利用B104CM从大鼠胚胎NSCs定向诱导OPCs的技术。这些结果表明,通过这种诱导方法能够获得大量高纯度的OPCs,为下一步对其进行生物学特性和临床细胞移植治疗研究打下了良好的基础。
本文通过基因差异表达研究NSCs和OPCs的分子特征,并探讨OPC分化的分子机制。首先,我们运用用第一部分工作建立的诱导方法,由大鼠胚胎(E15)NSCs诱导出高纯度的OPCs,然后利用cDNA微阵列技术作为研究平台,通过相应的生物信息学手段,分析了NSCs和由其直接分化而来的OPCs之间基因表达谱的异同。在1176个被检测基因中,共发现40个差异表达的基因,其中,28个基因在OPCs中上调,12个基因在OPCs中下调。RT-PCR分析进一步验证了部分基因,表明cDNA微阵列结果能准确反映NSCs和OPCs分子表达的差异。结果证明,PDGF-AA是诱导NSCs向OLs分化的重要调节因子,该过程由Erk信号转导途径及随后的转录因子c-fos,c-jun和olig2的表达上调所介导。该研究加深了我们对OL分化机制的理解,为今后将OLs用于中枢神经系统的轴突再生、髓鞘形成和功能恢复打下良好基础。